Tri-embryonic differentiation kit三胚层分化试剂盒提供了一种简单的诱导方案，可使人胚胎干(ES)和诱导的多能干(iPS)细胞向三个胚层分化的能力 神经性外胚层，中胚层和内胚层。该试剂盒包括专门的单一体系培养基和基于单层诱导（无需形成EB）的方案，对每个胚层进行平行的体外定向分化实验，在一周内清楚地、可重复地建立三系分化潜力。...
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第五节:小鼠Corning ® Matrigel® Matrix分装教程:1.取一瓶冷冻的Matrigel,置于-4℃冰箱过夜,当Matrigel完全融化后即可开始分装;2.准备1mL无菌吸头1盒,无菌的1.5 mL EP管若干,贴好标签(Matrigel批号,浓度,日期,操作人),放入EP冰盒上,均置于-20℃冰箱中预冷1小时以上;3.完全融化的Matrigel为可流动的白色液体;从冰箱取出插入碎冰中...
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第四节:小鼠小肠类器官复苏步骤:1.从液氮罐中取出待复苏的小肠类器官细胞,转移置于干冰泡沫箱中,取出一支待复苏的小肠类器官细胞置于37℃水浴锅手持轻轻摇晃,2 min内解冻,肉眼观察细胞悬液内冰晶即将完全消失时取出;75%酒精无尘纸擦拭冻存管表面,放入生物安全柜;...
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第三节:小鼠小肠类器官冻存步骤:1.从培养箱中取出待传代小肠类器官细胞,吸弃孔内的培养液,加入500 μL/孔的Immocell Reactive detergent medium,用经过Immocell Anti-Adherence Solution润洗的枪头吹打和刮取类器官,并将悬液转移至经过润洗的1.5 mL EP管中...
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第二节:小鼠小肠类器官传代教程:传代条件:1. 当孔中小肠类器官群体增殖(占胶85%左右),且平均直径为100-150 μm时,小肠类器官细胞状态良好时,即可立即传代,否则小肠类器官的生长和增殖速度会减慢,活力逐渐降低;传代间隔和比例:1. 可根据细胞生长状态和实验需求按1:3-1:5的比列进行传代...
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第一节：小鼠小肠类器官原代分离培养教程：1.将三号手术刀和配套刀片在安全柜内组装后,用刀背轻轻刮除小肠内壁的绒毛,尽量不要破坏其结果的完整性,刮除后用IMMOCELL Antibacterial detergent stock清洗2遍;2.将处理好的干净组织挑取到10cm无菌培养皿中,倒入少量IMMOCELL Reactive detergent(活性保持培养基)...
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第三节:小鼠下丘脑神经干细胞分离、培养、鉴定教程:操作过程:提前开启紫外线照射超净台30 分钟,将培养基和添加剂室温融化,使用前室温中预温10-30 分钟,紫外照射完毕后,75%酒精消毒超净台,超净台通风10 分钟以上;1将新生小鼠(1-3天)放到6 厘米细胞培养皿盖上,喷酒精后放置超净工作台中;2.在6 厘米培养皿中入2-3 毫升 PBS缓冲液...
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第二节:小鼠神经星形胶质细胞分离、培养、鉴定教程:操作步骤:1. 取3个10 厘米 培养皿,3个6 厘米 培养皿倒入HBSS缓冲液,置于冰盘上;2. 取出生2天内的新生鼠,泡入装有75%酒精的离心管内...
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第一节:小鼠神经小胶质细胞分离、培养、鉴定教程:实验准备:1.工具:小鼠神经小胶质细胞完全培养基、HBSS缓冲液、PBS磷酸缓冲液、10% FBS DMEM培养基、75%酒精、多聚赖氨酸等,操作步骤:1. 取3个10 厘米 培养皿,3个6 厘米 培养皿倒入HBSS缓冲液,置于冰盘上...
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第四节:人脐带间充质干细胞的制备:提前开启紫外线照射超净台30min,将培养基和添加剂室温融化,使用前室温中预温10-30min;紫外照射完毕后,75%酒精消毒超净台,超净台通风10min以上;完全培养基的配制:添加剂按1:100比例加入基础培养基中,轻柔摇匀培养基后备用;脐带MSC制备：(1)采集健康足月新生儿脐带,(2)75%酒精消毒脐带储运瓶,在超净台中取出脐带,酒精浸泡1min,用生理盐水清洗(将淤血清洗干净),将脐带剪短至2-3cm,(3)小心地将静脉血管和动脉血管剖离,撕取华通胶...
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第三节:人脐静脉内皮细胞原代分离,鉴定及培养,材料准备：试剂：PBS,胰酶,ECM完全培养基,HUVEC专用消化酶,脐带运输保存液,操作流程：1.将 15-20 cm 长的新生儿脐带放入无菌的 PBS 溶液(添加双抗和肝素钠)中储存;2. 使用50ml注射器,每次可以灌满新鲜PBS后可以用止血钳夹住脐带两端,轻缓揉捏,将脐带内的血块化开,方便冲洗干净...
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第二节：大鼠/小鼠骨髓间充质干细胞原代分离,培养及鉴定:准备分离BMSC所需的试剂有逸漠生物间充质干细胞基础培养基,逸漠生物胎牛血清,DMSO,双抗,逸漠生物PBS,0.25%胰酶,无血清细胞冻存液;分离过程;1. 以颈椎脱臼法SPF级出生1-3D(最大也可至4周龄)C57BL/6J小鼠或者SD/Wistar大鼠,用75%乙醇浸泡;2. 随后在鼠的腿的位置剪开外皮和内皮,无菌状态下取出双侧股骨和胫骨,浸泡于无菌含双抗PBS溶液中...
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