细胞培养过程中,生长不好的原因及解决方法
【可能原因】
① 细胞本身的状态
细胞传代次数多,细胞老化
细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢
细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长
胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡
细胞的冻存与复苏:慢冻速融
② 污染
支原体污染
霉菌污染
③ 培养基或血清
更换血清或培养基之前未进行验证
选择的培养基是否合适
培养基配制是否准确无误
④ 培养环境
CO2供应是否正常
培养箱或摇床温度控制是否正确
【解决方法】
① 注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等
② 避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清)
③ 要用合适的血清或培养基,最好经过验证
④ 注意实验室的环境
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