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HSF人皮肤成纤维细胞（免疫荧光鉴定）

Human Skin Fibroblasts

货号：IM-H032 来源：IMMOCELL

规格：1x10⁶cells/T25或1mL冻存管形态：成纤维细胞样，贴壁生长

培养基：成纤维细胞基础培养液（自用DMEM/F12+10%FBS+1%p/s+0.005mg/ml胰岛素+5ng/mlBfGF+1ug/ml氢化可的松+50ug/ml抗坏血酸（维C）+7.5mM L-Gln）

传代比例：1:2至1:3，每周 3次

价格：1800元

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搭配培养体系

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培养步骤
注意事项
售后服务

人皮肤成纤维细胞(HSF细胞)生长记录

一、细胞基本属性
细胞名称	人皮肤成纤维细胞(HSF细胞)
种属来源	人
组织来源	皮肤
生长特性	贴壁生长
细胞形态	成纤维细胞样
免疫荧光鉴定
细胞代数	10代以内
细胞规格	1×10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测	无
培养基	成纤维细胞基础培养液
培养条件	气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%
冻存条件	无血清冻存液，液氮储存
细胞货期	2-3周左右
运输方式	复苏发货（T25瓶免运输费用）/冻存发货（需加干冰运输费用）顺丰快递
特别说明	以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主
二、细胞培养操作
收货方式		T25瓶	冻存管
收货处理		观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状态	收到细胞后，需立即转入液氮冻存或直接复苏
传代密度		细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养	第二天换液并检查细胞密度
传代比例		首次传代建议1：2传代 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿	一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶
传代方法		a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。	将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
注意事项		1.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 2.因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。	1.收货时若发现干冰化完，检查冻存管是否融化，若已融化需直接离心细胞接种观察，若未融化可以将细胞按正常步骤保存； 2.为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻复苏细胞。
到货须知	1.收到细胞后，首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。 2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照（当天以及第 2,3 天请拍照），记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据)；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。 3.由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。
备注：客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以拨打技术服务电话：400-080-3389 按 2，我们随时给予解答。
三、细胞冻存操作
冻存液配方	无血清冻存液，液氮储存
细胞密度	待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例
冻存方法	a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，加 1 mL血清重悬细胞，进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x10⁶~1x10/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项	冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案
四、售后服务
重发标准	1.细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发； 2.收到细胞未开封，如出现污染状况，重发； 3.收到细胞3天内，发现污染问题，经核实后，重发； 4.常温发货的细胞静置 2 小时后，干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后，绝大多数细胞未存活，经核实后，重发； 5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后，出现污染，经核实后，重发； 6.细胞活性问题，请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，经核实后，重发； 7.视具体情况而定。
不予重发	1.客户操作造成细胞污染，不重发； 2.客户严重操作失误致细胞状态不好，不重发； 3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发； 4.细胞状态不好，未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片，不重发； 5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的，不重发； 6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的，不重发； 7.视具体情况而定。

参考文献：

Anti-Aging Effect and Mechanism of Proanthocyanidins Extracted from Sea buckthorn on Hydrogen Peroxide-Induced Aging Human Skin Fibroblasts. Antioxidants (Basel). 2022 Sep 25;11(10):1900. doi: 10.3390/antiox11101900. PMID: 36290623; PMCID: PMC9598642.

作者：Liu X, Xing Y, Yuen M, Yuen T, Yuen H, Peng Q.

细胞：human skin fibro-blasts(HSFs)

2022年影响因子/JCR分区：7.675/Q1

Targeting GPC3high cancer-associated fibroblasts sensitizing the PD-1 blockage therapy in gastric cancer

作者：Dinuo Li,Yu Wang,Ce Shi,Shuai Fu,Yi-Fei Sun,Chen Li.

细胞：HSF、HGC-27

2022年影响因子/JCR分区：5.348/Q2

Targeting GPC3ʰⁱᵍʰ cancer-associated fibroblasts sensitizing the PD-1 blockage therapy in gastric cancer10.1080/07853890.2023.2189295

作者：Dinuo Li;Yu Wang;Ce Shi;Shuai Fu;YiFei Sun;Chen Li

细胞：HSF

2023年影响因子：4.9

Skin healthcare protection with antioxidant and anti-melanogenesis activity of polysaccharide purification from Bletilla striata10.1016/J.IJBIOMAC.2024.130016

作者：Chen Haoying;Wu Yan;Wang Bin;Kui Minghong;Xu Jun;Ma Hongsheng;Li Jinpeng;Zeng Jinsong;Gao Wenhua;Chen Kefu

细胞：HSF

2024年影响因子：7.7

Protective effects of degraded Bletilla striata polysaccharides against UVB-induced oxidative stress in skin10.1016/J.IJBIOMAC.2024.134462

作者：Chen Haoying;Lin Changhui;Wu Yan;Wang Bin;Kui Minghong;Xu Jun;Ma Hongsheng;Li Jinpeng;Zeng Jinsong;Gao Wenhua;Chen Kefu

细胞：HSF

2024年影响因子：7.7

Anti-Aging Effect and Mechanism of Proanthocyanidins Extracted fromSea buckthornon Hydrogen Peroxide-Induced Aging Human Skin Fibroblasts10.3390/antiox11101900

作者：Xinying Liu;Yi Xing;Michael Yuen;Tina Yuen;Hywel Yuen;Qiang Peng

细胞：HSF

2024年影响因子：6