怎么解决实验中有遇到细胞凝集的情况?
怎么解决实验中有遇到细胞凝集的情况?
培养悬浮细胞时,细胞可能由于多种多样的原因而彼此贴附凝集形成团块。
引起细胞凝集的最常见原因是细胞培养基中存在游离DNA和细胞碎片,通常发生于细胞裂解后,DNA的粘性性质导致细胞和其他碎片聚合形成大的团块。
以下列举了引起细胞裂解和DNA释放到培养基中的部分原因:
1、过度消化,使用蛋白水解酶过度处理,如常用于细胞解离的胰蛋白酶,会造成细胞结块。
2、环境胁迫,机械力、重复冻融和其他环境压力可以加速细胞死亡,其早期症状可能就是细胞间粘附。
3、组织解离,通过化学、机械或酶学方法从原代组织制备单个细胞悬液,可能导致一些细胞破裂。从组织制备单个细胞悬液时通常需要使用胶原酶消化胞外基质。
4、过度生长,当细胞达到融汇时,细胞裂解产生的细胞碎片和游离DNA过度积聚。
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