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研究员都害怕,却不得不面对的“幽灵”:支原体污染

时间:2024-03-05 09:19:34 点击:499次

细胞增殖速度怎么变得这么慢了?细胞发生病变,出现细胞变圆、从培养瓶壁脱落又是什么情况?要疯了,培养细胞怎么就这么难呢~实验过程中存在的“幽灵”,即使是经验丰富的老研究员也不得不面对,没错,它就是支原体感染

支原体感染的威胁

支原体感染率高达63%,这也使得在细胞培养过程中“支原体污染”问题变成全球性,只要提及支原体污染,研究员往往都会陷入困惑。

它是一种类似细菌但不具有细胞壁的原核微生物,直径在 50-300 nm,可轻松通过0.22um滤膜混入培养系统中,普通的抗生素(如培养细胞常用的双抗)对它不起作用。

而且细胞培养物被支原体污染后往往没有明显的迹象,不像细菌或真菌污染有肉眼可见的变化,甚至细胞本身仍能在一段时间内继续维持正常的形态和增殖速率。

这些特点给我们判断和处理支原体污染带来了一定的麻烦。

  1. 可能导致实验结果不准确,因为支原体会与培养基中的其他成分相互作用,影响其他微生物的生长,从而干扰实验结果的收集和分析。

  2. 支原体污染可能会对实验设备和仪器造成损害,尤其是对实验室的生物安全柜和其他相关设备,因为支原体会在其上生长并形成菌膜,影响设备的正常运行。如果支原体数量较少,可能不会对测序结果产生明显影响。

  3. 如果支原体数量较多,它们可能会在测序过程中影响样本的质量,从而导致测序结果不准确。此外,支原体污染可能会导致样本中的序列 reads 数量减少,从而影响序列组装和基因表达分析等后续分析结果。

因此,在进行测序前,应该采取适当的措施来避免和减少支原体污染,如使用无菌技术、严格控制实验室环境、使用高质量的试剂和仪器等。如果已经出现了支原体污染,应该及时检测和处理,以减少对测序结果的影响。


支原体检测方式

对此我们并非手足无措,通过严密的消毒措施和合理的实验室管理,我们可以有效预防支原体感染,保障研究的顺利进行。有鉴于支原体污染对细胞生物学实验的重要负面影响,定期检测细胞是否被支原体污染成为了很多实验室的必然选项。

常见的支原体检测技术包括:分离培养法,DNA荧光染色检测法等等,但这里更推荐使用等温扩增法。其中分离培养法和DNA应该染色法操作难度较高,而等温扩增法作用浓度低,细胞毒性小,使用方便,即拆即用,只要添加到支原体污染的培养细胞中孵化一周即可



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