一、产品介绍
hESC/iPSC 铺板工作液是使用 VTN 包被蛋白（Vitronectin）配制的即用型工作液，VTN 是一种成分确定的，无异源成分的细胞基质，能够支持人类胚胎干细胞（human embryonic stem cell, hESC）以及人类诱导多能干细胞（human induced pluripotent stem cell, hiPSC）的生长和分化，可以与多能干细胞完全培养基一起使用，用于 hESC/iPSC 体外无饲养层培养。
二、产品信息
VTN 纯度≥95% 内毒素含量≤25 EU/mg
| 名称 | 规格 | 浓度 | 货号 | 数量 |
| hESC/iPSC Planking Solution Supplement | 1.2mL | 500μg/mL | IMC-014-P-1 | 1 管 |
| hESC/iPSC Planking Solution Basal Medium | 90mL | / | IMC-014-P-2 | 1 瓶 |
三、储存条件
基础培养基 2~8℃,VTN-20℃；2~8℃解冻，禁止反复冻融。
四、 VTN使用说明
1：VTN 的推荐包被浓度为 1 μg/cm2，以 6 孔板为例，6 孔板每孔面积 10 cm2，则 需要使用 10 μg VTN 包被蛋白。
| 不同培养容器 VTN 工作液推荐用量 | ||
| 容器 | 孔面积 | VTN用量 |
| 6孔板 | 10 cm2 /孔 | 10 μg |
| 60-mm 培养皿 | 20 cm2 | 20 μg |
| 100-mm 培养皿 | 60 cm2 | 60 μg |
| T-25 培养瓶 | 25 cm2 | 25 μg |
2：举例，一块 6 孔板总共有 60 cm2，包被需要 60 μg VTN ，即 120 μL （500 μ g/mL），可以将 VTN 分装成 120 μL（60 μg）/管，于 -20℃保存，每次使用时候取 1 管 VTN （120μL，60 μg），用基础培养基稀释成工作液，即可包被 1 块 6 孔板。
五 、 VTN分装
以分装 120μL/每管为例，可根据实验要求和使用说明进行分装。
1：VTN 于 4℃冰箱过夜解冻。
2：提前准备无菌枪头，EP 管于-20℃冰箱预冷。
3：将解冻的 VTN 与 EP 管置于冰上放入生物安全柜。
4：用预冷的枪头将 VTN 按 120μL/每管分装至 EP 管中，放入-20℃冰箱保存。
六 、工作液配制与培养板包被
以包被 6 孔板为例，操作程序同样适用于其他培养容器。
1. 取 1 管分装好的 VTN（120 μL，60 μg），4℃冰箱解冻。
2. 准备 1 个 15 mL 离心管，4℃冰箱取基础培养基分装出 9 mL，立即将解冻的 VTN 加入冷的基础培养基中，轻柔混匀稀释的 VTN 10-20 次，不要涡旋震荡。
3. 立即使用配制的工作液进行包被，按照 1.5mL/孔用量来包被 6 孔板。
4. 轻轻晃动培养皿，使稀释后的工作液均匀地铺在皿底表面。
5. 室温（15~25℃）静置至少 1 小时后使用。
TIPS：如不立即使用，密封培养皿以防 止工作液蒸发。建议 4℃条件保存包被后的培养皿，1 周内使用。
6. 使用时，将培养皿倾斜，用移液管或枪头吸尽工作液即可。确保包被后的培养皿底部 表面无划痕，也无需额外加相关溶液洗涤。
