MBNL1 knockout THP-1 cell line

补充内容

MBNL1（肌肉盲样蛋白1）是一种RNA结合蛋白，属于肌肉盲样蛋白家族，在RNA剪接和mRNA稳定中发挥重要作用。MBNL1蛋白通过识别特定的RNA序列，参与调节mRNA的可变剪接，影响特定基因的表达。 MBNL1的突变与强直性肌营养不良（DMD）等遗传性肌肉疾病有关。在DMD患者中，MBNL1的突变导致其功能受损，进而影响肌营养不良蛋白（dystrophin）的产生，这是导致肌肉损伤和功能障碍的关键因素。 在实验室研究中，MBNL1通常作为RNA剪接和基因表达调控的一个标志物，用于研究mRNA的可变剪接和基因表达的调控机制。此外，MBNL1的过表达或缺失模型被用于研究其在细胞生长、分化和疾病发生中的作用。 MBNL1基因敲除模型用于研究其在体内的功能。这些模型显示，MBNL1的缺失会导致mRNA剪接和基因表达的异常，影响细胞的生长和代谢。 在临床研究中，MBNL1的表达和活性可以作为诊断和监测某些疾病进展的指标。通过深入了解MBNL1的功能和作用，科学家们希望能够开发出新的治疗方法来治疗与RNA剪接和基因表达调控相关的疾病。

1.设计敲除序列：设计特定的DNA序列，这些序列可以与MBNL1基因的靶位点结合，从而导致基因的敲除。 

2.构建表达载体：将设计的sgRNA序列和Cas9基因克隆到表达载体中，这个载体将被转染到目标细胞中。 

3.细胞转染：将构建的表达载体通过化学方法或病毒载体系统转入目标细胞中。 

4.基因编辑：Cas9酶在sgRNA的引导下识别并切割目标基因，导致DNA断裂。 

5.筛选和验证：通过PCR、测序或特定的分子标记来确认是否成功敲除MBNL1基因。 

6.功能分析：对敲除MBNL1基因的细胞进行功能分析，以评估基因敲除对细胞代谢、生长和分化的影响。 

7. 稳定细胞系的建立：经过验证的敲除细胞会继续培养，以建立稳定的细胞系。 

Species

Gene ID

GenBank Accession

Transcript

Human (Homo sapiens)

MBNL1

NM_001376824.1

NP_001363753.1