BCAT2 knockout THP-1 cell line

补充内容

BCAT2（支链氨基酸转氨酶2）是一种在细胞内催化支链氨基酸（BCAAs）分解代谢的酶。BCAAs包括亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸，这些氨基酸对于蛋白质合成和肌肉功能至关重要。BCAT2通过将支链氨基酸的氨基转移到-酮戊二酸，生成支链酮酸（BCKAs）和谷氨酸，从而参与BCAAs的降解过程。 BCAT2的失调与多种疾病有关，包括肥胖、2型糖尿病、某些类型的癌症和神经退行性疾病。因此，BCAT2是药物设计和疾病治疗中的一个重要靶点。 在实验室研究中，BCAT2通常作为BCAAs代谢的一个标志物，用于研究BCAAs如何影响细胞生长和代谢。此外，BCAT2的过表达或缺失模型被用于研究其在细胞生长、凋亡和氨基酸代谢中的作用。 BCAT2基因敲除模型用于研究其在体内的功能。这些模型显示，BCAT2的缺失会导致BCAAs代谢的改变，影响细胞的生长和代谢。 在临床研究中，BCAT2的表达和活性可以作为诊断和监测某些疾病进展的指标。通过深入了解BCAT2的功能和作用，科学家们希望能够开发出新的治疗方法来治疗与BCAAs代谢相关的疾病。

1.设计敲除序列：设计特定的DNA序列，这些序列可以与BCAT2基因的靶位点结合，从而导致基因的敲除。 

2.构建表达载体：将设计的sgRNA序列和Cas9基因克隆到表达载体中，这个载体将被转染到目标细胞中。 

3.细胞转染：将构建的表达载体通过化学方法或病毒载体系统转入目标细胞中。 

4.基因编辑：Cas9酶在sgRNA的引导下识别并切割目标基因，导致DNA断裂。 

5.筛选和验证：通过PCR、测序或特定的分子标记来确认是否成功敲除BCAT2基因。 

6.功能分析：对敲除BCAT2基因的细胞进行功能分析，以评估基因敲除对细胞代谢、生长和分化的影响。 

7. 稳定细胞系的建立：经过验证的敲除细胞会继续培养，以建立稳定的细胞系。 

Species

Gene ID

GenBank Accession

Transcript

Human (Homo sapiens)

BCAT2

NP_001158245

NP_001158245.1