Hexokinase I knockout THP-1 cell line

补充内容

Hexokinase I（HK I）是葡萄糖激酶的一种同型，属于糖激酶家族。HK I在细胞内催化葡萄糖的第一步磷酸化反应，生成葡萄糖-6-磷酸。这一过程是糖酵解途径的起始步骤，对于细胞的能量代谢至关重要。 HK I的活性受到多种因素的影响，包括葡萄糖浓度、细胞类型、细胞周期和细胞应激状态。HK I的表达和活性在多种疾病中发生改变，包括癌症、糖尿病和神经退行性疾病。因此，HK I是药物设计和疾病治疗中的一个重要靶点。 在实验室研究中，HK I通常作为葡萄糖代谢的一个标志物，用于研究葡萄糖如何影响细胞生长和代谢。此外，HK I的过表达或缺失模型被用于研究其在细胞生长、凋亡和葡萄糖代谢中的作用。 HK I基因敲除模型用于研究其在体内的功能。这些模型显示，HK I的缺失会导致葡萄糖代谢的改变，影响细胞的生长和代谢。 在临床研究中，HK I的表达和活性可以作为诊断和监测某些疾病进展的指标。通过深入了解HK I的功能和作用，科学家们希望能够开发出新的治疗方法来治疗与葡萄糖代谢相关的疾病。

1.设计敲除序列：设计特定的DNA序列，这些序列可以与HK I基因的靶位点结合，从而导致基因的敲除。 

2.构建表达载体：将设计的sgRNA序列和Cas9基因克隆到表达载体中，这个载体将被转染到目标细胞中。 

3.细胞转染：将构建的表达载体通过化学方法或病毒载体系统转入目标细胞中。 

4.基因编辑：Cas9酶在sgRNA的引导下识别并切割目标基因，导致DNA断裂。 

5.筛选和验证：通过PCR、测序或特定的分子标记来确认是否成功敲除HK I基因。 

6.功能分析：对敲除HK I基因的细胞进行功能分析，以评估基因敲除对细胞代谢、生长和分化的影响。 

7. 稳定细胞系的建立：经过验证的敲除细胞会继续培养，以建立稳定的细胞系。

Species

Gene ID

GenBank Accession

Transcript

Human (Homo sapiens)

HK1

NP_000179

NP_000179.2