MyD88 knockout THP-1 cell line

补充内容

MyD88（Myeloid differentiation primary response protein MyD88）是一种在先天免疫和适应性免疫中起关键作用的信号转导分子。它属于IL-1受体相关激酶（IRAK）家族，参与Toll样受体（TLRs）和白细胞介素-1受体（IL-1R）介导的信号转导途径。 MyD88通过其死亡域与Toll样受体和IL-1R的下游分子IRAKs相互作用，从而激活NF-κB和MAPK等转录因子，诱导细胞因子的产生和炎症反应。MyD88依赖的信号通路在细菌和病毒感染、自身免疫性疾病和某些类型的癌症中起着重要作用。 MyD88的失调与多种疾病有关，因此，MyD88是药物设计和疾病治疗中的一个重要靶点。 在实验室研究中，MyD88通常作为先天免疫和适应性免疫的一个标志物，用于研究TLRs和IL-1R介导的信号转导途径如何影响细胞生长和代谢。此外，MyD88的过表达或缺失模型被用于研究其在细胞生长、凋亡和炎症反应中的作用。 MyD88基因敲除模型用于研究其在体内的功能。这些模型显示，MyD88的缺失会导致TLRs和IL-1R介导的信号通路的改变，影响细胞的生长和代谢。 在临床研究中，MyD88的表达和活性可以作为诊断和监测某些疾病进展的指标。通过深入了解MyD88的功能和作用，科学家们希望能够开发出新的治疗方法来治疗与先天免疫和适应性免疫相关的疾病。

1.设计敲除序列：设计特定的DNA序列，这些序列可以与MyD88基因的靶位点结合，从而导致基因的敲除。 

2.构建表达载体：将设计的sgRNA序列和Cas9基因克隆到表达载体中，这个载体将被转染到目标细胞中。 

3.细胞转染：将构建的表达载体通过化学方法或病毒载体系统转入目标细胞中。 

4.基因编辑：Cas9酶在sgRNA的引导下识别并切割目标基因，导致DNA断裂。 

5.筛选和验证：通过PCR、测序或特定的分子标记来确认是否成功敲除MyD88基因。 6. 功能分析：对敲除MyD88基因的细胞进行功能分析，以评估基因敲除对细胞代谢、生长和分化的影响。 

7. 稳定细胞系的建立：经过验证的敲除细胞会继续培养，以建立稳定的细胞系。

Species

Gene ID

GenBank Accession

Transcript

Human (Homo sapiens)

MyD88

NP_001166037

NP_001166037.2