TRIF knockout THP-1 cell line

补充内容

TRIF（TIR domain-containing adapter inducing interferon-β）是一种在先天免疫中起关键作用的信号转导分子，属于TIR（Toll/IL-1R domain-containing adaptor protein）家族。TRIF主要通过激活Toll样受体（TLRs）3、TLR4和TLR7介导的信号转导途径，诱导下游的免疫反应和炎症反应。 当细胞识别到病毒RNA（如通过TLR3）或脂多糖（如通过TLR4）时，TRIF可以与TLRs结合并激活IRF3和IRF7等转录因子，从而诱导IFN-β等细胞因子的产生。这些细胞因子进一步激活免疫反应和炎症反应，帮助清除病毒感染和细菌感染。 TRIF的失调与多种疾病有关，包括病毒感染、自身免疫性疾病和某些类型的癌症。因此，TRIF是药物设计和疾病治疗中的一个重要靶点。 在实验室研究中，TRIF通常作为先天免疫的一个标志物，用于研究TLRs介导的信号转导途径如何影响细胞生长和代谢。此外，TRIF的过表达或缺失模型被用于研究其在细胞生长、凋亡和炎症反应中的作用。 TRIF基因敲除模型用于研究其在体内的功能。这些模型显示，TRIF的缺失会导致TLRs介导的信号通路的改变，影响细胞的生长和代谢。 在临床研究中，TRIF的表达和活性可以作为诊断和监测某些疾病进展的指标。通过深入了解TRIF的功能和作用，科学家们希望能够开发出新的治疗方法来治疗与先天免疫相关的疾病。 

1.设计敲除序列：设计特定的DNA序列，这些序列可以与TRIF基因的靶位点结合，从而导致基因的敲除。 

2.构建表达载体：将设计的sgRNA序列和Cas9基因克隆到表达载体中，这个载体将被转染到目标细胞中。 

3.细胞转染：将构建的表达载体通过化学方法或病毒载体系统转入目标细胞中。 

4.基因编辑：Cas9酶在sgRNA的引导下识别并切割目标基因，导致DNA断裂。 

5.筛选和验证：通过PCR、测序或特定的分子标记来确认是否成功敲除TRIF基因。 

6.功能分析：对敲除TRIF基因的细胞进行功能分析，以评估基因敲除对细胞代谢、生长和分化的影响。 

7. 稳定细胞系的建立：经过验证的敲除细胞会继续培养，以建立稳定的细胞系。 

Species

Gene ID

GenBank Accession

Transcript

Human (Homo sapiens)

TRIF

NP_001372607

NP_001372607.1