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PLC/PRF/5人肝癌亚力山大细胞（STR鉴定正确）

货号：IM-H413 来源：ATCC

规格：1x10⁶cells/T25或1mL冻存管形态：上皮细胞样，贴壁生长

培养基：90%MEM+10%FBS

传代比例：1:2至1:3，每周 3次

培养环境：气相：95%空气+5%二氧化碳;温度：37℃

价格：1600元

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培养步骤
注意事项
售后服务

PLC/PRF/5细胞(人肝癌亚力山大细胞系)STR鉴定报告

一、细胞基本属性
细胞名称	PLC/PRF/5人肝癌亚力山大细胞（STR鉴定正确）
细胞别称	PLC-PRF-5; PLC PRF 5; PLC/PRF5; PLCPRF5; PLC-8024; PLC8024; PLC; Alexander cells; Alexander; Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5
种属来源	人
供应限制	仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
组织来源	肝癌；亚力山大细胞
生长特性	贴壁生长
细胞形态	上皮细胞样
背景简介	PLC/PRF/5细胞系分泌乙肝病毒表面抗原（HBsAg），原先被支原体污染，后用BM-cycline去除支原体。
STR位点	AMEL:X,X；CSF1PO:10,10；D12S391:15,20；D13S317:11,12；D16S539:13,13；D18S51:17,17；D19S433:11,13；D21S11:30,33.2；D2S1338:19,22；D2S441:12,14；D3S1358:15,15；D5S818:12,12；D6S1043:13,21；D7S820:9,11；D8S1179:13,16；FGA:19.2,25；Penta D:6,10；Penta E:10,16；TH01:8,8；TPOX:8,
STR鉴定图片
细胞代数	10代以内
生物安全等级	2 [Cells contain hepatitis B]
细胞规格	1x10⁶cells/T25或1mL冻存管
支原体检测	无
保藏机构	ATCC; CRL-8024 ECACC; 85061113
培养基	90%MEM+10%FBS
培养条件	气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件	无血清冻存液，液氮储存
倍增时间	~36-48小时
基因表达情况	hepatitis virus B surface antigen (HBsAg)
细胞货期	现货，1周左右
运输方式	复苏发货（T25瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用）顺丰快递
供应限制	仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明	以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主
二、细胞培养操作
收货方式		T25瓶	冻存管
收货处理		观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状态	收到细胞后，需立即转入液氮冻存或直接复苏
传代密度		细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养	第二天换液并检查细胞密度
传代比例		首次传代建议1：2传代 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿	一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶
传代方法		a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。 d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。	将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
注意事项		1.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 2.因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。	1.收货时若发现干冰化完，检查冻存管是否融化，若已融化需直接离心细胞接种观察，若未融化可以将细胞按正常步骤保存； 2.为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻复苏细胞。
到货须知	1.收到细胞后，首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。 2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照（当天以及第 2,3 天请拍照），记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据)；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。 3.由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。
备注：客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以拨打技术服务电话：400-080-3389 按 2，我们随时给予解答。
三、细胞冻存操作
冻存液配方	无血清冻存液，液氮储存
细胞密度	待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例
冻存方法	a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，加 1 mL血清重悬细胞，进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x10⁶~1x10⁷/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项	冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案
四、售后服务
重发标准	1.细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发； 2.收到细胞未开封，如出现污染状况，重发； 3.收到细胞3天内，发现污染问题，经核实后，重发； 4.常温发货的细胞静置 2 小时后，干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后，绝大多数细胞未存活，经核实后，重发； 5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后，出现污染，经核实后，重发； 6.细胞活性问题，请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，经核实后，重发； 7.视具体情况而定。
不予重发	1.客户操作造成细胞污染，不重发； 2.客户严重操作失误致细胞状态不好，不重发； 3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发； 4.细胞状态不好，未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片，不重发； 5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的，不重发； 6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的，不重发； 7.视具体情况而定。
五、参考文献
Coronin 6 promotes hepatocellular carcinoma progression by enhancing canonical Wnt/beta-catenin signaling pathway. J Cancer. 2021 Nov 4;12(24):7465-7476. doi: 10.7150/jca.62873. PMID: 35003366; PMCID: PMC8734404. 作者：Zhang J, Li P, Li T, Zhou Z, Wu H, Zhang L. 细胞：HCC cell lines Hep3B, Huh7, SMMC-7721, HepG2 and PLC/PRF/5, as well as normal human liver cell lineL-O2 2022年影响因子/JCR分区：4.478/Q2 Experimental and clinical evidence suggests that GRPEL2 plays an oncogenic role in HCC development. Am J Cancer Res. 2021 Sep 15;11(9):4175-4198. PMID: 34659882; PMCID: PMC8493396. 作者：Lai MC, Zhu QQ, Xu J, Zhang WJ. 细胞：293T, THLE-2, Hep3B, PLC/PRF/5, HepG2 and Huh7 cells 2022年影响因子/JCR分区：5.942/Q2 Objective to identify and verify the regulatory mechanism of DTNBP1 as a prognostic marker for hepatocellular carcinoma. Sci Rep. 2022 Jan 7;12(1):211. doi: 10.1038/s41598-021-04055-4. PMID: 34997064; PMCID: PMC8742032. 作者：Cheng X, Li D, Qi T, Sun J, Zhou T, Zheng WV. 细胞：Normal liver cell line THLE-2 and HCC cell lines (Hep3B, HepG2, Huh7, and PLC/PRF/5) 2022年影响因子/JCR分区：4.996/Q2 The Mitochondrial Protein C1QBP Promotes Hepatocellular Carcinoma Progression by Enhancing Cell Survival, Migration and Invasion. J Cancer. 2022 May 9;13(8):2477-2489. doi: 10.7150/jca.69379. PMID: 35711850; PMCID: PMC9174857. 作者：Hou G, Lu Z, Wang Z, Yang X. 细胞：HCC cell linesLi-7, SNU-182, huh-7, HCC-LM3, SMMC-7721, HepG2, MHCC-95H, PLC/PRF/5 and normal liver cell line THLE-2 2022年影响因子/JCR分区：4.478/Q2 Ribosomal protein L32 enhances hepatocellular carcinoma progression Accepted: 3 March 2023 作者：Guoxin Hou、Zhimin Lu、Jialu Jiang、Xinmei Yang 细胞：L-O2, HCC-LM3, Hep G2,Huh-7,PLC/PRF/5,,MHCC97-H,SNU-182,SMMC-7721,SK-HEP-1 2022年影响因子/JCR分区：4.711/Q2 Objective to identify and verify the regulatory mechanism of DTNBP1 as a prognostic marker for hepatocellular carcinoma \| Scientific Reports 作者：Xianyi Cheng, Dezhi Li, Tiangyang Qi, Jia Sun, Tao Zhou 、 Wei V. Zheng、Scientific Reports volume 细胞：THLE-2、Hep3B、HepG2、Huh7、PLC/PRF/5 2023年影响因子/JCR分区：4.6/Q2 USP35 promotes HCC development by stabilizing ABHD17C and activating the PI3K/AKT signaling pathway. Cell Death Discov. 2023 Nov 22;9(1):421. doi: 10.1038/s41420-023-01714-5. PMID: 37993419; PMCID: PMC10665393. 作者：Wang L, Wang J, Ma X, Ju G, Shi C, Wang W, Wu J. 细胞：HEK293T、Hep3B、HepG2、Huh-7、MHCC97H、PLC/PRF/5、SMMC-7721、SNU-182、SK-Hep-1、LO-2、 HCC827、NCI-H460 2024年影响因子/JCR分区：7/Q2 Deubiquitinating enzyme JOSD2 promotes hepatocellular carcinoma progression through interacting with and inhibiting CTNNB1 degradation. Cell Biol Int. 2022 Jul;46(7):1089-1097. doi: 10.1002/cbin.11812. Epub 2022 May 14. PMID: 35568970. 作者：Huang Y, Zeng J, Liu T, Xu Q, Song X, Zeng J. 细胞：Hep3B和PLC/PRF/5 2024年影响因子/JCR分区：3.9/Q3

PLC/PRF/5人肝癌亚力山大细胞（STR鉴定正确）

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