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MCF-10A人乳腺上皮细胞（STR鉴定正确）

Human Normal Mammary Epithelial Cells

货号：IM-H315 来源：中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心

规格：1×10⁶cells/T25或1mL冻存管形态：上皮细胞样，贴壁生长

传代方法：1:2至1:3，每周3次

培养环境：气相：95%空气+5%二氧化碳;温度：37℃

价格：2500元

MCF-10A细胞说明书在线咨询

搭配培养体系

产品信息
培养步骤
冻存处理
售后规定

一、细胞基本属性
细胞名称	MCF-10A人乳腺上皮细胞（STR鉴定正确）
细胞别称	MCF 10A；人乳腺上皮细胞
种属来源	人
组织来源	乳腺
生长特性	贴壁生长
细胞形态	上皮细胞样
STR位点	Amelogenin：X；CSF1PO：10,12；D12S391：17,20；D13S317：8,9；S16S539：11,12；D18S51：18,19；D19S433：13,15；D21S11：28,30；D2S1338：21,26；D3S1358：14,18；D5S818：10,13；D6S1043：12,18；D7S820：10,11；D8S1179：14,16；FGA：22,24；Penta E：13,14；TH01：8,9.3；TPOX：9,11；vWA：15,17；
STR鉴定图片
细胞代数	10代以内
使用权限	A类
细胞规格	1×10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测	无
保藏机构	中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心
培养基	准备MEGM kit培养基备注：培养基包含（A+B） A: MEBM基础培养液 B: 细胞生长添加剂 5管霍乱毒素（cholera toxin）;(100ng/ml) 500 ul P/S青霉素-链霉素5 ml
培养条件	气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件	无血清冻存液，液氮储存
细胞货期	现货，1周左右
运输方式	复苏发货（T25瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用）顺丰快递
供应限制	仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明	以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主
二、细胞培养操作
收货方式		T25瓶	冻存管
收货处理		观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状态	收到细胞后，需立即转入液氮冻存或直接复苏
传代密度		细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养	24-48h后换液
传代比例		首次传代建议1：2传代 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿	一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶
传代方法		1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。 3. 轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加1-2mL培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中。	1）将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。24-48h后换液。
注意事项		1.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 2.因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。	1.收货时若发现干冰化完，检查冻存管是否融化，若已融化需直接离心细胞接种观察，若未融化可以将细胞按正常步骤保存； 2.为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻复苏细胞。
到货须知	1.收到细胞后，首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。 2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照（当天以及第 2,3 天请拍照），记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据)；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。 3.由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。
备注：客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以拨打技术服务电话：400-080-3389 按 2，我们随时给予解答。
三、细胞冻存操作
冻存液配方	无血清冻存液，液氮储存
细胞密度	待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例
冻存方法	1，细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化，可使用血球计数板计数。 2，4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml完全培养基重悬细胞，根据细胞数量加入DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为7.5%，细胞密度1-2xE6/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。 3，将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项	冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案
四、售后服务
重发标准	1.细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发； 2.收到细胞未开封，如出现污染状况，重发； 3.收到细胞3天内，发现污染问题，经核实后，重发； 4.常温发货的细胞静置 2 小时后，干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后，绝大多数细胞未存活，经核实后，重发； 5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后，出现污染，经核实后，重发； 6.细胞活性问题，请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，经核实后，重发； 7.视具体情况而定。
不予重发	1.客户操作造成细胞污染，不重发； 2.客户严重操作失误致细胞状态不好，不重发； 3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发； 4.细胞状态不好，未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片，不重发； 5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的，不重发； 6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的，不重发； 7.视具体情况而定。

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