293T人胚肾细胞生长记录
一、细胞基本属性 | ||||
细胞名称 | 293T人胚肾细胞(STR鉴定正确) | |||
细胞别称 | Hek293T; HEK-293T; HEK 293T; HEK-293-T; HEK 293 T; 293-T; 293 T; 293T; Human Embryonic Kidney 293T; 293tsA1609neo | |||
种属来源 | 人 | |||
组织来源 | 肾 | |||
生长特性 | 贴壁生长 | |||
细胞形态 | 上皮细胞样 | |||
细胞代数 | 10代以内 | |||
背景介绍 | 293细胞株插入SV40 T-抗原的温度敏感基因后产生的高转染效率的衍生株称为293T | |||
STR位点 | Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12,14;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D21S11:28,30.2;D3S1358:15,16,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;PentaD:9,10;PentaE:7,15;TH01:7,9.3;TPOX:11;VWA:16,19 | |||
STR鉴定图片 | ||||
生物安全等级 | 1 | |||
细胞规格 | 1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装 | |||
支原体检测 | 无 | |||
保藏机构 | ATCC; CRL-3216 DSMZ; ACC-635;中国典型培养物保藏中心细胞库 | |||
倍增时间 | ~24-30 hours | |||
培养基 | 90% DMEM+10% FBS+PS | |||
培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ | |||
冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 | |||
细胞货期 | 现货,1周左右 | |||
运输方式 | 复苏发货(T25瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递 | |||
供应限制 | 仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 | |||
特别注意 | 293T细胞贴壁不牢,运输过程中细胞会有脱落,如细胞脱落,请离心收集,消化后重新铺瓶 | |||
特别说明 | 以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主 | |||
二、细胞培养操作 | ||||
收货方式 | T25瓶 | 冻存管 | ||
收货处理 | 观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态 | 收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏 | ||
传代密度 | 细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养 | 第三天换液并检查细胞密度 | ||
传代比例 | 首次传代建议1:2传代 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿 | 一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶 | ||
传代方法 | a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 | 将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL完全培养基,培养过夜)。第三天换液并检查细胞密度。 | ||
注意事项 | 1.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 2.因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。 | 1.收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存; 2.为保证细胞的高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞。 | ||
到货须知 | 1.收到细胞后,首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发,细胞是否解冻,若有上述现象发生请及时和我们联系。 3.由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 | |||
备注:客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打技术服务电话:400-080-3389 按 2,我们随时给予解答。 | ||||
三、细胞冻存操作 | ||||
冻存液配方 | 无血清冻存液,液氮储存 | |||
细胞密度 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例 | |||
冻存方法 | a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x106~1x107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 | |||
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 | |||
四、售后服务 | ||||
重发标准 | 1.细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发; 2.收到细胞未开封,如出现污染状况,重发; 3.收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发; 4.常温发货的细胞静置 2 小时后,干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发; 5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后,出现污染,经核实后,重发; 6.细胞活性问题,请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发; 7.视具体情况而定。 | |||
不予重发 | 1.客户操作造成细胞污染,不重发; 2.客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发; 3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发; 4.细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片,不重发; 5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发; 6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发; 7.视具体情况而定。 | |||
五、参考文献 | ||||
Association of RGS20 expression with the progression and prognosis of renal cell carcinoma. Oncol Lett. 2021 Sep;22(3):643. doi: 10.3892/ol.2021.12904. Epub 2021 Jul 7. PMID: 34386065; PMCID: PMC8299006. 作者:Jiang L, Shen J, Zhang N, He Y, Wan Z 细胞:293T cells 2022年影响因子/JCR分区:3.111/Q3 Experimental and clinical evidence suggests that GRPEL2 plays an oncogenic role in HCC development. Am J Cancer Res. 2021 Sep 15;11(9):4175-4198. PMID: 34659882; PMCID: PMC8493396. Identification of ubiquitin-specific protease 32 as an oncogene in glioblastoma and the underlying mechanisms. Sci Rep. 2022 Apr 19;12(1):6445. doi: 10.1038/s41598-022-09497-y. PMID: 35440702; PMCID: PMC9018837. LncRNA FAM13A-AS1 Promotes Renal Carcinoma Tumorigenesis Through Sponging miR-141-3p to Upregulate NEK6 Expression. Front Mol Biosci. 2022 Mar 23;9:738711. doi: 10.3389/fmolb.2022.738711. PMID: 35402517; PMCID: PMC8984162. Long Intergenic Noncoding RNA 00641 Promotes Growth and Invasion of Colorectal Cancer through Regulating miR-450b-5p/GOLPH3 Axis. J Oncol. 2022 Jun 15;2022:8259135. doi: 10.1155/2022/8259135. PMID: 35756081; PMCID: PMC9217543. Low-dose metformin targets the lysosomal AMPK pathway through PEN2. Nature. 2022 Mar;603(7899):159-165. doi: 10.1038/s41586-022-04431-8. Epub 2022 Feb 23. PMID: 35197629; PMCID: PMC8891018. MiR-548d-3p Promotes Gastric Cancer by Targeting RSK4. Cancer Manag Res. 2020 Dec 24;12:13325-13337. doi: 10.2147/CMAR.S278691. PMID: 33380838; PMCID: PMC7769082. MiR-145-5p Suppresses Hepatocellular Carcinoma Progression by Targeting ABHD17C. Neutralizing antibodies against EBV gp42 show potent in vivo protection and define novel epitopes USP10 promotes intrahepatic cholangiocarcinoma cell survival and stemness via SNAI1 deubiquitination. J Mol Histol. 2023 Dec;54(6):703-714. doi: 10.1007/s10735-023-10150-9. Epub 2023 Sep 27. PMID: 37755617. Vascular mimicry induced by m6A mediated IGFL2-AS1/AR axis contributes to pazopanib resistance in clear cell renal cell carcinoma. Cell Death Discov. 2023 Apr 11;9(1):121. doi: 10.1038/s41420-023-01423-z. PMID: 37037853; PMCID: PMC10086028. Non-overlapping epitopes on the gHgL-gp42 complex for the rational design of a triple-antibody cocktail against EBV infection. Cell Rep Med. 2023 Nov 21;4(11):101296. doi: 10.1016/j.xcrm.2023.101296.IF: 14.3 Q1 B1. PMID: 37992686; PMCID: PMC10694767. Circ_ZNF512-Mediated miR-181d-5p Inhibition Limits Cardiomyocyte Autophagy and Promotes Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury through an EGR1/mTORC1/TFEB-Based Mechanism. J Med Chem. 2022 Feb 10;65(3):1808-1821. doi: 10.1021/acs.jmedchem.1c00745. Epub 2022 Jan 18. PMID: 35041407. IRAK1 deficiency potentiates the efficacy of radiotherapy in repressing cervical cancer development. Cell Signal. 2024;119:111192. doi:10.1016/j.cellsig.2024.111192 IF: 4.4 Q2 B2 A cocktail nanovaccine targeting key entry glycoproteins elicits high neutralizing antibody levels against EBV infection. Nat Commun. 2024;15(1):5310. Published 2024 Jun 21. doi:10.1038/s41467-024-49546-w Lithocholic acid binds TULP3 to activate sirtuins and AMPK to slow down ageing. Nature (2024). https://doi.org/10.1038/s41586-024-08348-2(对HEK293T细胞和MEFs进行STR鉴定) Lithocholic acid phenocopies anti-ageing effects of calorie restriction. Nature (2024). https://doi.org/10.1038/s41586-024-08329-5(对HEK293T细胞和MEFs进行STR鉴定,进行果蝇S2细胞的物种鉴定) |
细胞培养相关问题
-
细胞增殖速度怎么变得这么慢了?细胞发生病变,出现细胞变圆、从培养瓶壁脱落又是什么情况?要疯了,培养细胞怎么就这么难呢~实验过程中存在的“幽灵”,即使是经验丰富的老研究员也不得不面对,没错,它就是支原体感···...
阅读详情 -
胎牛血清和小牛血清的差别在哪里? 胎牛血清和小牛血清的差别在哪里? 胎牛血清(FBS) :从八月龄胎牛心脏穿刺取血。适用于专业的研究和试验,包括干细胞研究、免疫分析和抗体生产。 新生牛血青/小牛血清(NBCS) :从自出···...
阅读详情 -
适合细胞长期保存的温度是多少? 适合细胞长期保存的温度是多少? 细胞长期保存温度是-130°C或更低。液氮罐中气态层温度在-140°C至-180°C之间细胞可保存在气态层或浸入液氮中,如果可以最好保存在气态层,因为这样···...
阅读详情
细胞培养指南
-
hiPSC人诱导多能干细胞培养教程:在培养hiPSC细胞前,需准备好hESC/iPSC完全培养基配制和Matrigel铺板,hiPSC人诱导多能干细胞复苏操作,1. 将水浴锅预热至37℃;并将Matrigel包被的6孔板,提前放置生物安全柜中约1小时恢复···...
阅读详情 -
H9人胚胎干细胞培养条件与方法:1. 将水浴锅预热至37℃,并将Matrigel包被的6孔板,提前放置生物安全柜中约1小时恢复至室温(15~30℃);2. 取4 mL hESC/iPSC完全培养基,按照1:4000比例加入1 μL的hESC/iPSC Supplement C,···...
阅读详情 -
H1人胚胎干细胞培养指南:在培养h1干细胞之前,首先要准备好hESC/iPSC完全培养基配制, 铺板,H1人胚胎干细胞复苏步骤:1.将水浴锅预热至37℃;并将Matrigel包被的6孔板,提前放置生物安全柜中约1小时恢复至室温(15~30℃);···...
阅读详情