一、细胞基本属性 |
细胞全称 | Raji人Burkitt's淋巴瘤细胞(STR鉴定正确) |
细胞别称 | RAJI;P1-Raji;GM04671 |
种属来源 | 人 |
年龄性别 | 男;11岁 |
组织来源 | B淋巴细胞;Burkitt's淋巴瘤 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞形态 | 淋巴母细胞 |
细胞代数 | 10代以内 |
背景介绍 | Raji细胞由PulvertaftRJV于1963年从一位11岁黑人男孩的左上颌骨的Burkitt淋巴瘤中分离建立的,是第一个人类造血系统的连续传代细胞,为B细胞起源。该细胞中含有EBV,需要在二级生物安全柜中操作;可作转染宿主。 |
STR位点 | Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:13;D16S539:8,11;D18S51:17;D19S433:14,14.2;D21S11:28,31;D2S1338:22;D3S1358:15,16;D5S818:10,13;D7S820:10;D8S1179:14,15;FGA:19,27;TH01:6,7;TPOX:8,13;vWA:16,19; |
STR鉴定图片 | ![Raji人Burkitt's淋巴瘤细胞STR鉴定图片 Raji人Burkitt's淋巴瘤细胞STR鉴定图片](/static/upload/image/20220119/1642578471143540.jpg) |
生物安全等级 | 2 |
细胞规格 | 1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装 |
支原体检测 | 无 |
保藏机构 | ATCC; CCL-86 ATCC; CRL-7936 DSMZ; ACC-319 ECACC; 85011429;中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心 |
倍增时间 | ~24-36 hours |
培养基 | RPMI-1640+10% FBS+PS |
培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ |
冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
倍增时间 | ~24-36 hours |
染色体 | 43~48 |
细胞货期 | 现货,1周左右 |
运输方式 | 复苏发货(T25瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递 |
供应限制 | 仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 |
特别说明 | 以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
二、细胞培养操作 |
收货方式 | T25瓶 | 冻存管 |
收货处理 | 观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态 | 收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏 |
传代密度 | 细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养 | 第二天换液并检查细胞密度 |
传代比例 | 首次传代建议1:2传代 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿 | 一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶 |
传代方法 | 方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心3-5min分钟,弃去上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:4的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
| 将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后轻轻吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
注意事项 | 1.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 2.因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。 | 1.收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存; 2.为保证细胞的高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞。 |
到货须知 | 1.收到细胞后,首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发,细胞是否解冻,若有上述现象发生请及时和我们联系。 2.静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照),记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。 3.由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 4.仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。 |
备注:客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打技术服务电话:400-080-3389 按 2,我们随时给予解答。 |
三、细胞冻存操作 |
冻存液配方 | 无血清冻存液,液氮储存 |
细胞密度 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例 |
冻存方法 | a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,加 1 mL血清重悬细胞,进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x106~1x107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
四、售后服务 |
重发标准 | 1.细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发; 2.收到细胞未开封,如出现污染状况,重发; 3.收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发; 4.常温发货的细胞静置 2 小时后,干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发; 5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后,出现污染,经核实后,重发; 6.细胞活性问题,请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发; 7.视具体情况而定。 |
不予重发 | 1.客户操作造成细胞污染,不重发; 2.客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发; 3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发; 4.细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片,不重发; 5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发; 6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发; 7.视具体情况而定。 |