细胞生长状况有关指标的检测方法:判定细胞增殖能力的指标主要是生长曲线、分裂指数、细胞周期、克隆形成率及细胞活力等测定,不同生长状态指标检测方法不同,细胞计数的基本步骤:取清洁计数板和专用盖玻片,用丝绸布轻轻拭干...
阅读详情293细胞的大规模培养:哺乳细胞的大规模培养方式有三种:贴壁培养、微载体培养、无血清悬浮培养,这三种方式均可用于293细胞的大规模培养,不管是哪种培养方式,首要的一点是必须操作规范、防止污染;其次根据需要选择合适的293细胞培养方式,对细胞生长状况实行有效的监控,以便获得稳定的蛋白或病毒产物...
阅读详情293细胞培养技术: 293细胞明显适应酸性环境,pH值在6.9~7.1时,可顺利贴壁生长, 换液时动作要轻,一般用高糖的DMEM培养基,293细胞贴壁不牢,运输过程中细胞会有脱落,如细胞脱落,请离心收集,消化后重新铺瓶,HEK293用大瓶培养较小瓶要好,可能是更有利于293均匀的分布,利于营养的摄取...
阅读详情人肝癌细胞株的鉴定: 据研究人员所知,目前大约有40种人肝细胞肿瘤细胞系,包括文献中提到的HCCS和肝母细胞瘤,此外,在宿主基因组中整合HBV基因的HCC细胞株数量有限,新建立的HBV基因整合的HCC细胞系有望拓宽HBV相关HCCS的研究范围...
阅读详情细胞培养室使用规范:细胞培养室是进行各种细胞培养的净化级实验室,所有进入实验室的人员都必须遵守实验室有关的规章制度,培养箱使用规则,显微镜使用规则,生物安全柜相关操作规则等...
阅读详情细胞培养过程中如何消毒灭菌及有效避免污染:细胞培养对无菌环境的要求较为严格,微生物污染通常是造成细胞培养失败的主要原因,细胞间的杀菌主要涉及空气的杀菌,常见消毒方法分为三类:物理灭菌法(紫外线,湿热,干烤,过滤等),化学灭菌法(各种化学消毒剂)和抗生素,通过避免频繁查看细胞、重视细胞房管理工作,规范操作、定期维护和灭菌,可以预防污染...
阅读详情细胞室二氧化碳培养箱的消毒使用和维护:细胞室二氧化碳培养箱可通过清洁、消毒、灭菌处理来维护,清洁箱体表面、内部、玻璃门,对培养箱消毒和灭菌可通过液体消毒剂、紫外消毒、加热,除了以上几种方法外,还可以采用联合杀菌的方法,几种消毒灭菌的方法同时使用来达到彻底清洁的效果...
阅读详情来自CX43野生型和基因敲除小鼠的永生化小鼠皮质星形胶质细胞的构建和鉴定:我们报告了源自野生型和 Cx43-null 小鼠的 hTERTimmortalized 星形胶质细胞系的特征,命名为 IWCA 和永生化 Cx43-null 皮质星形胶质细胞 (IKOCA) 细胞,关于星形胶质细胞特异性 mRNA 和蛋白质的表达以及几个不同的功能特性,我们还证明了在 IKOCA 细胞中外源表达的由 Cx43 形成的 GJ 斑块在外观上与在野生型原代星形胶质细胞培养物中表达的 GJ 斑块相似,表明这些细胞系可用于研究细胞和分子操作对星形胶质细胞结构的影响和功能...
阅读详情SV40 T抗原对未成熟和成熟小鼠星形胶质细胞的永生化:由于星形胶质细胞已被SV40 T抗原 (Tag) 表达永生化,并且由于永生化已被证明在双分化的特定阶段诱捕细胞,因此我们在不同的出生后时间将培养的星形胶质细胞永生化,以询问Tag是否可以在未成熟和成年阶段固定星形胶质细胞,此外,定量评估星形胶质细胞特征在永生化细胞系中保留的程度将为使用这些细胞系的研究以及改善永生化载体的努力提供基础...
阅读详情单克隆稳定株和混合稳定株如何选择:当需要去除细胞群体干扰因素的时候,推荐使用单克隆稳定细胞株,其基因组背景相对单一,对实验结果干扰因素小,当进行系统生物学研究时,需考虑细胞群体因素,同时也是由于不同细胞个体差异大,而且不同整合位点的单克隆细胞株表现出来的细胞行为可能不一致,所以许多实验使用混合克隆株更能去除细胞间差异造成的干扰,因此,选择单克隆细胞株还是混合克隆细胞株,需要根据实验目的而定...
阅读详情通过 Cas9 快速鉴定基因组编辑的间充质干细胞单克隆:我们发现含有 Tween 20 和蛋白酶 K(PK) 的裂解缓冲液是从仅 10 个细胞中释放 DNA 的最有效方法,其灵敏度足以用于 PCR 检测此前,我们已经确定了一种优化的具有更高基因组编辑效率的引导 RNA 结构,并建立了一种更有效的 Cas9-gRNA 质粒构建策略,然后我们将这些技术结合在一起,将免疫抑制基因 iL-10 插入到 AAVS1 位点安全人类基因组的安全港...
阅读详情人子宫内膜在位病灶来源的永生化基质原代细胞的建立:在这项研究中,我们通过转染编码 hTERT 的慢病毒载体建立并表征了永生化的人类子宫内膜异位症在位基质细胞 (iheESCs), iheESCs 维持 hTERT 的高表达,在连续培养 42 代时保持原始形态,heESCs中雌激素/孕激素受体和EMT标志物的表达与原代细胞保持稳定一致,此外,iheESCs 保持正常生长和迁移和侵袭能力...
阅读详情