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小鼠胰腺星状细胞（永生化）

货号：IM-M088

规格：1×106cells/T25或1mL冻存管形态：多角型或星型细胞，不规则细胞，贴壁生长

培养基：小鼠胰腺星状细胞完全培养基

传代比例：1:2至1:3，每周 2-3次

培养环境：气相：95%空气+5%二氧化碳;温度：37℃

价格：2500元

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搭配培养体系

产品信息
培养步骤
注意事项
售后服务

一、细胞基本属性
细胞名称	小鼠胰腺星状细胞（永生化）
种属来源	小鼠
组织来源	胰腺组织
生长特性	贴壁生长
细胞形态	多角型或星型细胞，不规则细胞
背景简介	胰腺进行性纤维化是慢性胰腺炎典型的病理表现，在这个过程中扮演中心角色的是一种多角形或星状细胞，即胰腺星状细胞。胰腺星状细胞分布在胰腺小叶间和腺泡间，在胰腺纤维化过程中，其被多种病理因子激活，分泌多种细胞外基质，包括胶原、启动和促进了纤维化这一病理过程。正常情况下，胰腺星状细胞处于非激活的静止期状态，球形。当胰腺受损伤或者受到细胞生长因子等刺激后转变为激活状态。小鼠胰腺星状细胞永生化细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。
细胞鉴定	结蛋白（Desmin)或者平滑肌肌动蛋白（α-SMA）免疫荧光染色为阳性，纯度高于90%
细胞代数	10代以内
细胞规格	1×10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测	无
培养基	小鼠胰腺星状细胞完全培养基
培养条件	气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件	无血清冻存液，液氮储存
细胞货期	现货，1周左右
运输方式	复苏发货（T25瓶免运输费用）/冻存发货（需加干冰运输费用）顺丰快递
供应限制	仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明	以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主
二、细胞培养操作
收货方式		T25瓶	冻存管
收货处理		观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状态	收到细胞后，需立即转入液氮冻存或直接复苏
传代密度		细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养	第三天换液并检查细胞密度
传代比例		首次传代建议1：2传代，1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿	一管细胞建议接种到6cm培养皿或者T25瓶
传代方法		a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗小鼠胰腺星状细胞永生化细胞1-2次。 b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min（视细胞消化情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。 c、将小鼠胰腺星状细胞永生化细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。	将含有1 mL小鼠胰腺星状细胞永生化细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有小鼠胰腺星状细胞永生化细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第三天换液并检查细胞密度。
注意事项		1.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 2.因运输问题，部分小鼠胰腺星状细胞永生化细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。	1.收货时若发现干冰化完，检查冻存管是否融化，若已融化需直接离心细胞接种观察，若未融化可以将细胞按正常步骤保存； 2.为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻复苏细胞。
到货须知	1.收到细胞后，首先观察并拍照记录小鼠胰腺星状细胞永生化细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。 2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照（当天以及第 2,3 天请拍照），记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据)；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。 3.由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。
备注：客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以拨打技术服务电话：400-080-3389 按 2，我们随时给予解答。
三、细胞冻存操作
冻存液配方	无血清冻存液，液氮储存
细胞密度	待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例
冻存方法	a、收集小鼠胰腺星状细胞永生化细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，加 1 mL血清重悬细胞，进行细胞计数。 b、根据小鼠胰腺星状细胞永生化细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x10⁶~1x10⁷/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项	冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案
四、售后服务
重发标准	1.细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发； 2.收到细胞未开封，如出现污染状况，重发； 3.收到细胞3天内，发现污染问题，经核实后，重发； 4.常温发货的细胞静置 2 小时后，干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后，绝大多数细胞未存活，经核实后，重发； 5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后，出现污染，经核实后，重发； 6.细胞活性问题，请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，经核实后，重发； 7.视具体情况而定。
不予重发	1.客户操作造成细胞污染，不重发； 2.客户严重操作失误致细胞状态不好，不重发； 3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发； 4.细胞状态不好，未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片，不重发； 5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的，不重发； 6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的，不重发； 7.视具体情况而定。

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