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BV2小鼠小胶质细胞（种属鉴定正确）

Mouse Microglia Cells

货号：IM-M042 来源：中国典型培养物保藏中心细胞库

规格：1×10⁶cells/T25或1mL冻存管形态：多形型，半贴壁生长

培养基：MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S

传代方法：1:2至1:3，每周 2-3次

价格：1200元

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搭配培养体系

产品信息
培养步骤
注意事项
售后服务

一、细胞基本属性
细胞名称	BV2小鼠小胶质细胞
细胞别称	BV2；小鼠小胶质细胞
种属来源	小鼠
组织来源	脑；胶质瘤
生长特性	半贴壁生长
细胞形态	多形型
细胞代数	10代以内
背景简介	BV-2细胞是由E·Blasi建立于1990年；BV-2细胞由小鼠小神经胶质细胞经逆转录病毒介导转染v-raf/v-myc获永生化。BV-2细胞保留有小神经胶质细胞多种形态、表征和功能特征；免疫组化结果显示，BV-2细胞为MAC1、MAC2阳性；而MAC3、胶质细胞原纤维酸性蛋白、半乳糖脑苷脂为阴性。
使用权限	A类
物种鉴定报告	BV2物种鉴定报告.pdf
细胞规格	1×10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测	无
保藏机构	中国典型培养物保藏中心细胞库
培养基	MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S
培养条件	气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件	无血清冻存液，液氮储存
重要备注	BV-2细胞为半贴壁细胞，有部分细胞会聚团飘起属于正常现象，处理时，将上清细胞一同收集处理即可
细胞货期	现货，1周左右
发货方式	复苏发货（免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用）顺丰快递
供应限制	仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明	以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主
二、细胞培养操作
收货方式		T25瓶	冻存管
初步平衡		用75%酒精擦拭细胞瓶表面，放37度培养箱内静置培养4-6h，以便稳定细胞状态	无须平衡，直接放入-80冰箱（不超过一周）或者液氮罐保存，建议尽早复苏
传代密度		细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养	第二天换液并检查细胞密度
传代比例		首次传代建议1：2传代，1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿	一管细胞建议接种到6cm培养皿或者T25瓶
传代方法		a、收集细胞培养上清：抽出瓶中的培养基和悬浮的细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清，细胞重悬后接种到新的培养瓶中（加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基）。 b、剩下贴壁的细胞，用不含钙、镁离子的PBS轻轻润洗细胞1次。 c、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -2min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 d、按3mL/瓶补加培养基，轻轻打匀吹下细胞后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。 e、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养中。	将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
注意事项		悬浮细胞收货注意事项： 1、收货时需镜下拍照（看密度、状态） 2、静置后需镜下拍照（看整体密度） a.如密度50%以下，建议换液并竖瓶培养 b.如密度50%-80%，建议换液培养，隔天观察密度 c.如密度90%，建议传代 3、换液及传代处理前，培养瓶竖着放置至少半小时（使细胞沉到瓶底）；收集上清，必须将瓶内所有培养基（70ml）全部收集！并用PBS（10ml）润洗瓶底并收集！离心转速为1000rpm，5min。 4.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 5.因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。	1.收货时若发现干冰化完，检查冻存管是否融化，若已融化需直接离心细胞接种观察，若未融化可以将细胞按正常步骤保存； 2.为保证细胞的高存活率，收到产品后，请立即解冻复苏细胞。
到货须知	1.收到细胞后，首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。 2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照（当天以及第 2,3 天请拍照），记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据)；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。 3.由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。
备注：客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以拨打技术服务电话：400-080-3389 按 2，我们随时给予解答。
三、细胞冻存操作
冻存液配方	无血清冻存液，液氮储存
细胞密度	待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例
冻存方法	a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，加 1 mL血清重悬细胞，进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5x10⁶~1x10⁷/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项	冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案
四、售后服务
重发标准	1.细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发； 2.收到细胞未开封，如出现污染状况，重发； 3.收到细胞3天内，发现污染问题，经核实后，重发； 4.常温发货的细胞静置 2 小时后，干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后，绝大多数细胞未存活，经核实后，重发； 5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后，出现污染，经核实后，重发； 6.细胞活性问题，请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，经核实后，重发； 7.视具体情况而定。
不予重发	1.客户操作造成细胞污染，不重发； 2.客户严重操作失误致细胞状态不好，不重发； 3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发； 4.细胞状态不好，未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片，不重发； 5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的，不重发； 6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的，不重发； 7.视具体情况而定。
五、参考文献
Seven lower toxicity celastrol derivatives by biotransformation of Pestalotiopsis sp. LGT-1. Phytochemistry. 2023 Sep;213:113750. doi: 10.1016/j.phytochem.2023.113750. Epub 2023 Jun 4. PMID: 37279870. 作者：Zhang S, Liu L, Yue B, Wu X, Ji H, Wang J, Jiang Z, Liu C, Wu X. 细胞：4T1、A549、B16、U251、BV-2、AC16和PC12 2024年影响因子/JCR分区：3.8/Q1 Recruitment of PVT1 Enhances YTHDC1-Mediated m6A Modification of IL-33 in Hyperoxia-Induced Lung Injury During Bronchopulmonary Dysplasia. Inflammation. 2023 Nov 2. doi: 10.1007/s10753-023-01923-1. Epub ahead of print. PMID: 37917328. 作者：Bao T, Liu X, Hu J, Ma M, Li J, Cao L, Yu B, Cheng H, Zhao S, Tian Z. 细胞：4T1、A549、B16、U251、BV-2、AC16和PC12 2024年影响因子/JCR分区：5.1/Q2

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