小鼠NK细胞

                        自然杀伤细胞(natural killer cell，NK)是机体重要的免疫细胞，不仅与抗肿瘤、 抗病毒感染和免疫调节有关，而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生。一种稳定表达在NK和LAK细胞表面的LAK-1分子，120kDa，NK细胞在IL-2条件下培养20天LAK-1仍为阳性，而HNK-1(CD57）和CD16部分消失。LAK的杀伤活性可被抗LAK-1 McAb所抑制。

                        自然杀伤细胞刺激因子（natural killer cell stimulatory factor,NKSF) 对NK细胞有刺激作用。IL-2、IL-12、IFN-α、TNF-α以及白细胞调节素(leukoregulin,LR) 对NK细胞的活化和分化有正调节作用， 体外培养时加入上述细胞因子可明显提高NK的杀伤活性。前列腺素 (PG)E1、E2、D2和肾上腺皮质激素等对NK细胞的活性有抑制作用。

                    1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

                    2.添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；

                    3.用吸管轻轻吹打混匀，按1:2比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；

                    4.待细胞完全贴壁后，培养观察；之后每2-3天换液一次新鲜的完全培养基。

                    备注：由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同，以上方法仅供各实验室参考

                    客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以拨打技术服务电话：400-080-3389 按 2，我们随时给予解答。

                    1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

                    2.在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。

                    3.传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

                    4.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。

                        1.收到细胞后，首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。

                        2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照（当天以及第 2,3 天请拍照），记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据)；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

                        3.由于运输的原因，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

                        4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

                        1.细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；

                        2.收到细胞未开封，如出现污染状况，重发；

                        3.收到细胞3天内，发现污染问题，经核实后，重发；

                        4.常温发货的细胞静置 2 小时后，绝大多数细胞未存活，经核实后，重发；

                        5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封，出现污染，经核实后，重发；

                        6.细胞活性问题，请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，经核实后，重发；

                        7.视具体情况而定。

                        1.客户操作造成细胞污染，不重发；

                        2.客户严重操作失误致细胞状态不好，不重发；

                        3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；

                        4.细胞状态不好，未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片，不重发；

                        5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的，不重发；

                        6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的，不重发；

                        7.视具体情况而定。

作者：Chen H, Huang Z, Lei A, Yu X, Shen M, Wu D.

细胞：NK

2024年影响因子/JCR分区：3.6/Q2