【参考答案】
如下原因应该考虑：
1.缓冲液的pH值
2.缓冲液从冰箱内拿出后要室温恢复温度才用，过冷的缓冲液冲洗会导致细胞脱落
3.细胞培养时间过长或传代次数过多
4.你的细胞长的太满了，细胞长到80-90%就要处理
【参考答案】
你所见到的白色细胞团，所谓象菌落一样，是即将死亡的细胞，细胞用平衡盐溶液冲洗的时候，脱落下来的都是你的细胞，只能说你的细胞已经长过了，过了对数生长期，生长的活力和帖壁的能力已经下降
【参考答案】
估计是你的溶液出问题了或者是细胞长得太密了。你同时培养的其他瓶里的细胞怎么样?如果都飘起了还是要考虑所用液体(培养基及所用缓冲液)的问题，如果就这一瓶细胞这样子，估计是细胞太密了，就死了。
【参考答案】
应该是细胞状态不好所致。宜及时换液、及时传代。
【参考答案】
1、细胞密度太低了，你传代或者冻存密度太低(从你图片上看)，细胞与细胞之间相互因子不够，必然脱落。
建议：不要忙于传代或者冻存，适当地提高细胞密度试试看。
2、降低消化液密度，估计对细胞损伤较大，影响其贴壁。
3、如果上述方式还不行，在培养瓶底部适当地涂抹胶原，包被过的培养瓶会有助于细胞贴壁。
【参考答案】
我怎么感觉是污染了呢。我做原代也出现过这宗细胞大面积脱落的情况，我看你的倒置显微镜下，感觉是污染了呢。
1.一般如果是胰酶消化的问题，那细胞是圆圆的不贴壁，一换液全没了，这个问题我做原代时遇到过，我原来用0.25的胰酶消化表皮细胞，消化后是根本不贴壁，而不是表现为贴壁后大面积脱落。后来换的0.05的消化，正常贴壁生长。
2.如果是细胞密度太稀的话，那就是单个细胞不长，或者长得很慢，以前看过一个报道说细胞也是具有孤独感的，如果细胞太稀是不会体现大面积脱落的，应该是细胞增殖慢，且内部出现黑点，细胞老化才是。
3。关于包被表衬培养皿，一般直接购买的corning或者nunc这些进口的耗材培养表面都是经过处理的，易于细胞贴壁的。也有使用一些帮助贴壁的，但是那是特殊细胞，比如包被鼠尾胶来帮助肝原代细胞贴壁，包被多聚赖氨酸来帮助神经元贴壁。如果你原来做不用包被就能很好的贴壁的话，那我觉得和包不包被没有很大关系。
【参考答案】
结论：细胞生长状态差。
建议用胶原酶代替胰酶，以降低对细胞的损伤。
【参考答案】
培养箱污染是细胞污染的重要原因。正确处理方法是拆除培养箱内所有金属板、金属支架和风扇，全部用纱布沾70%酒精(要拧干)擦洗。你很可能会看到风道内(可沿风扇追踪)的大量霉菌。
甲醛熏蒸不能解决问题，因为风道内可能有大量有机物残留(灰尘、棉纤维、霉菌)，很容易再次长菌。
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