您好,问下SH-SY5Y细胞收货出现皱缩、聚团、脱落该怎么处理好?
【参考方法】
SH-SY5Y细胞收货出现皱缩
常温细胞收货后,把细胞放进培养箱静置2-4小时即可。
如果4小时后细胞仍然没有铺展开,密度适中的前提下可以放培养箱中静置过夜(过夜前倒出部分培养基,留5-10mL在瓶中,瓶盖拧松)。
SH-SY5Y细胞收货时出现聚团
常温细胞收货后,先把细胞放进培养箱静置2-4小时以稳定状态,再进行传代。
传代用含EDTA的0.25%胰蛋白酶消化1-3min左右。
SH-SY5Y细胞收货时出现脱落
常温细胞收货后,先把细胞放进培养箱静置2-4小时以稳定状态再处理。
脱落后的细胞通常聚团漂浮,通过离心将漂浮的细胞团收集起来,在离心管里进行胰酶消化后重新铺板即可。
贴壁细胞常规方法消化下来,和处理好的脱落细胞合并,混匀后铺板。
收货脱落处理
1.1200rpm(约250g)3min离心收集SH-SY5Y细胞,去除旧培养基;
2.PBS 重悬SH-SY5Y细胞,再次 1200rpm(约250g)3min离心,去除PBS;
3.加入 1mL 左右 0.25%胰酶重悬细胞,吹打1-2下吹起沉淀即可;
4.放入培养箱约 1-3min;
5.用移液枪轻轻吹打细胞悬液,使SH-SY5Y细胞团分散;
6.迅速加入 3-5mL 含血清的培养基混匀以终止消化;
7.1200rpm(约250g)3min离心,去除胰酶;
8.加入新鲜培养基按合适比例接入无菌培养器皿中。
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