重组胰蛋白酶消化液（含EDTA，不含酚红）

胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶，它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切段，水解细胞间的蛋白质，破坏细胞间的连接，从而使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。本品采用微生物发酵表达而获得的高纯度、高比活重组胰蛋白酶作为主要原料，通过无菌过滤配制而成的细胞消化液，产品中不使用任何含动物源的原料，产品受外源病毒污染的风险极低，具有极高的生物安全性，可完全代替猪源或牛源胰蛋白酶（Trypsin）用于干细胞、免疫细胞治疗、疫苗、药物筛选、抗体等领域细胞消化过程。
重组胰蛋白酶消化液是一种成分明确的、不含动物源成分的消化液，可完全替代传统胰酶消化液。本产品可用于原代细胞培养中的组织细胞分散（将组织块制备成单个细胞悬液）； 传代培养的贴壁细胞的消化分散； 微载体方法培养的细胞消化和严禁接触动物源的生物制药等领域。

a. 吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
b. 加入少量重组胰酶细胞消化液，略盖过细胞即可，室温放置30秒至3分钟。不同的细胞消化时间有所不同。
c. 显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除重组胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
d. 如果发现消化不足，则加入重组胰酶细胞消化液重新消化。
如果发现细胞消化时间过长，未及时吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，可以直接用重组胰酶细胞消化液把细胞全部吹打下来。离心沉淀细胞，尽量去除重组胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。

1. 无动物源性：胰蛋白酶为重组生产，生产过程中不使用任何动物源原料，无外源病毒污染等潜在不定因素的风险，符合药品管理规定。
2. 符合药典标准：成分中的重组胰蛋白酶符合药典相关标准，提供质量和安全保障。
3. 消化性能好：胰蛋白酶纯度高，避免了杂质对细胞生长的影响。比传统胰酶消化液具有更大的特异性，作用更温和， 已证明能够分离在无血清和血清补充系统中培养的细胞。
4. 低内毒素，无细菌、真菌、支原体、噬菌体等污染。

图1. 重组胰蛋白酶细胞消化液消化不同细胞的效果图。用重组胰蛋白酶消化液分别消化HT22、SK-MES-1、5-8F细胞，

在1-2分钟内，显微镜下可观察到细胞边缘明显收缩，紧密贴合的细胞离散成单个细胞。

使用本公司的重组胰蛋白酶消化液消化UC-MSC，传代3次对细胞形态没有影响。