本视频为厦门逸漠生物出品关于贴壁细胞复苏步骤操作指南,我们对每一步操作都做了演示,以便实验者更好地理解贴壁细胞复苏实验过程。
贴壁细胞复苏实验准备
提前打开水浴锅设置37C,提前开启紫外照射30min消毒灭菌,工作台开灯通风10min,用75%酒精擦拭台面
贴壁细胞复苏所需试剂物品
细胞培养液,胰酶,PBS,培养皿等
细胞复苏步骤
第一步:从液氮罐中迅速取出冻存管,立即放入37°C水浴箱中
第二步:轻轻摇晃,使细胞快速融化解冻,最好在1min内完成
第三步:将冻存管移入离心机中1000rpm离心3min
第四步:取4mL完全培养基到一个新的6cm培养皿中,在培养皿上标记细胞名称,日期和所用培养基名称
第五步:离心结束后,以75%酒精喷冻存管外部,移入无菌操作台内
第六步:从冻存管中吸走上清,用1ml完全培养基重悬后,移入6cm皿中
第七步:“8字法”摇匀后,镜检是否铺匀
第八步:把培养皿放入C02培养箱中培养,第二天观察贴壁情况
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