大鼠小鼠脂肪干细胞原代分离,培养及鉴定:材料准备:脂肪干细胞专用培养基、PBS溶液(IMC-401)、0.25%胰蛋白酶细胞消化液 (IMC-501)、I型胶原酶溶液 (1 mg/mL),实验步骤:1. 3天龄到4周龄(推荐周龄小)大鼠或小鼠1只,麻醉,75%乙醇浸泡3-5min。无菌条件下切开腹股沟皮肤,暴露腹股沟脂肪垫...
阅读详情hESC细胞培养教程之:hESC细胞传代步骤:1. 从培养箱中取出待传代细胞,吸弃孔内的hESC培养基,加入2 mL/孔的DPBS,轻轻摇晃并吸弃,再加入2 mL/孔的Immocell EDTA传代工作液(0.5 mM),使溶液完全覆盖孔底,将培养板置于细胞培养箱中;2. 吸弃6孔板中1孔的Matrigel包被液,加入预温的 Y-27632+hESC完全培养基2 mL/孔在6孔板上做好标记(细胞名称,代次,传代比例,日期和操作人);...
阅读详情hESC细胞培养教程之:hESC细胞冻存:1. 从培养箱中取出待冻存细胞,吸弃皿中的hESC培养基,加入2 mL/孔的DPBS,再吸弃;加入2 mL/孔的Immocell EDTA传代工作液(0.5 mM), 使溶液完全覆盖孔底,将培养板置于细胞培养箱中;2. 注意;保持6孔板与培养箱金属隔板直接接触了,使其受热均匀,不要叠放,设定消化时间10 min...
阅读详情hESC细胞培养教程之:hESC细胞复苏步骤:1.从液氮罐中取出待复苏的细胞,转移置于干冰泡沫箱中,取出一支待复苏的细胞置于37℃水浴锅手持轻轻摇晃,2 min内解冻,肉眼观察细胞悬液内冰晶即将完全消失时取出;75%酒精无尘纸擦拭冻存管表面,放入生物安全柜;2.将细胞悬液移至15 mL离心管中,随后逐滴缓慢加入10 mL DMEM/F12,轻柔晃动混匀细胞,160 g离心5 min...
阅读详情hESC细胞培养教程之:基质胶分装与铺板:1.取一瓶冷冻的Matrigel,置于-4℃冰箱过夜,当Matrigel完全融化后即可开始分装;2.准备1mL无菌吸头1盒,无菌的1.5 mL EP管若干,贴好标签(Matrigel批号,浓度,日期,操作人),放入EP冰盒上,均置于-20℃冰箱中预冷1小时以上;3.完全融化的Matrigel为可流动的红色液体;从冰箱取出插入碎冰中...
阅读详情第十五课:利用条件性重编程构建PDX诱导的稳定细胞系:通过病人来源的肿瘤细胞经免疫缺陷的小鼠移植可获得肿瘤细胞,但是这类细胞虽然能够在免疫缺陷的小鼠体内传代,但是体外培养则会导致大部分细胞出现衰老和增殖停止,为克服以上问题,作者引入条件性重编程系统进行体外扩增人源的肿瘤细胞,并借此研究其对于药物开发的应用...
阅读详情第十四课:条件性重编程小儿气管表皮细胞:研究早期生命呼吸道疾病的人体细胞模型:管表皮细胞是人体中气管和免疫反应的重要细胞交互界面,气管表皮细胞具有进化上保守的天然免疫受体能够控制病原微生物,在研究成人的哮喘建立基于表皮细胞因子的新颖疗法和生物标志物,但是,关于新生儿气管表皮细胞的研究极为稀少,其主要原因是缺乏显著扩增新生儿气管表皮细胞的生物学方法...
阅读详情第十三课:2017 多临床前模型鉴定癌瑞格作为唾液腺腺样囊性癌的治疗的潜在药物:腺样囊性癌(ACC)中的唾液腺肿瘤是极其罕见的,这种肿瘤一般发生在青少年和中年人群中,虽然这种肿瘤的发生过程比较缓慢,但是其能够入侵到外周神经和血管中从而导致肿瘤的转移,对于原位的肿瘤可以采取手术切除的方法,但是应对转移的肿瘤尚未有明确报道能够有效治疗的手段...
阅读详情第十二课:条件性重编程培养的原代人的乳腺表皮细胞的鉴定:实验结果一、条件性重编程培养的乳腺表皮细胞的形态学特征;二、培养的原代乳腺表皮细胞表达表皮细胞标志物;三、培养的原代细胞保留雌性激素受体并对雌性激素产生应答;四、3D培养的原代细胞具有复杂的三级结构...
阅读详情研究背景实验结果一、HEC细胞条件性培养中诱导表达的表皮干细胞分子依赖于β-catenin下游基因二、HEC条件性重编程培养中Wnt信号并不激活β-catenin三、HEC条件性重编程过程中GSK3信号通路四、HEC条件性重编程中mTOR使Akt失活五、HEC条件性重编程中上调PP2A调节和催化亚基蛋白于β-catenin的结合六、OA能够同时抑制β-cateni...
阅读详情第十课:建立C57BL/6 背景的MYC诱导的前列腺肿瘤的小鼠模型和细胞系:实验结果,一、B6MYC 小鼠病理进程的组织学分析;二、B6MYC转基因小鼠微环境的改变;三、建立B6MYC-CaP细胞系;四、B6MYC-CaP细胞仍保留对雄性激素的依赖...
阅读详情第九课:原代肿瘤细胞培养:优化的乳腺细胞培养和条件性重编程培养:实验结果一、不同遗传背景下的乳腺细胞和乳腺癌细胞的原代培养;二、EpiC和CRC培养细胞的同种移植分化;三、EpiC和CRC以及同种移植的细胞转录本的分析;四、GO分析不同培养条件下的公共差异基因;五、不同培养条件下共同差异基因与转录因子结合位点的关系...
阅读详情