产品描述
类器官传代消化液可应用于多种哺乳动物(如人、鼠、猪、蝙蝠、牛等)组织来源类器官的常规传代,可使类器官从基质胶中分离,并可使其温和地消化为小细胞簇或单细胞,同时保持其传代后的生长活力。
产品信息
表1. 试剂盒组成信息
产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 储存 |
IMV-A001L | 类器官消化液 | 500mL | 2-8℃,18个月 |
IMV-A001S | 类器官消化液 | 100mL | 2-8℃,18个月 |
类器官传代消化
1. 向回收后的类器官中加入 5-10 倍类器官基质胶混合物体积的类器官传代消化液,吹打混匀后在 37°C 条件下孵育 3-15 min 使类器官解离(提前取所需体积的消化液在 37°C 条件下预热, 通常单层结构类器官的消化时间为 0.5-3 min,多层或者体积较大的类器官消化时间为 3-15min)。
注意:在此操作过程中须仔细监测消化过程,建议每隔 3-5min 吹打并镜检一次,避免过度消化。也可实时取少量消化悬液于显微镜下观察消化情况,当观察到较多的单细胞或直径在 50μm 以下的细胞簇后,即可认为消化完成。
2. 在确认消化完成的悬液中,加入至少五倍体积的类器官基础培养基进行稀释,从而终止消化作用。
注意:时间较长的消化过程结束后可适当加入胎牛血清(IMC-101-500)至终浓度 2%-5%以保证消化后细胞的活力。
3. 将上步骤所获类器官悬液进行离心(水平离心转子,150-300g,3 min),弃上清,再次加入基础培养基重悬类器官沉淀。
4.将上步骤所获类器官悬液进行离心(水平离心转子,150-300g,3 min),弃上清后所获类器官可用于后续类器官培养、冻存等实验操作。