| 一、细胞基本属性 |
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细胞名称 |
人食管平滑肌细胞 |
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种属来源 |
人 |
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组织来源 |
食管 |
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生长特性 |
贴壁生长 |
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形态特征 |
成纤维细胞样 |
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质量检测 |
平滑肌肌动蛋白（α-SMA）免疫荧光染色为阳性，纯度高于 90%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等 |
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产品规格 |
5×105cells/T25细胞培养瓶 |
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培养基 |
含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
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培养条件 |
气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃ |
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换液频率 |
每2-3天换液一次 |
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消化液 |
0.25%胰蛋白酶 |
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产品货期 |
3-4周 |
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运输方式 |
T25培养瓶/ 顺丰快递（包邮） |
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供应限制 |
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 |
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背景介绍 |
食管是咽和胃之间的消化管，哺乳动物的食管结构上由内向外分四层:黏膜层、黏膜下层、肌层、外膜。食管平滑肌集中在肌层，仅在食管的下 2/3段存在，其中中段的 1/3位骨骼肌和平滑肌混合组成，下1/3段全部为平滑肌，而上段1/3全部为骨骼肌。食管的运动，上部的横纹肌受舌咽神经和迷走神经的支配，这些运动神经元末梢以运动终板形式进入骨骼肌。迷走神经尚支配食管其余部分的平滑肌，其节前纤维末梢与食管壁内神经丛的节细胞发生突触联系，再发出节后纤维支配平滑肌细胞。在吞咽时，吞咽中枢兴奋通过上述运动神经元和迷走神经传出纤维，引起食管各段的肌肉发生蠕动。食管壁内神经丛可以不依赖外来神经来控制食管蠕动。 |
| 二、细胞培养操作 |
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收货处理 |
取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态 |
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传代密度 |
细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养 |
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传代代数 |
可传5代左右；3代以内状态最佳，建议收到细胞后尽快进行相关实验 |
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传代方法 |
1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2.添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3.用吸管轻轻吹打混匀，按1:2比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4.待细胞完全贴壁后，培养观察；之后每2-3天换液一次新鲜的完全培养基。 |
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细胞实验 |
因原代细胞贴壁特殊性，原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚懒氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。 |
备注：由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同，以上方法仅供各实验室参考
客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以拨打技术服务电话：400-080-3389 按 2，我们随时给予解答。 |
| 三、注意事项 |
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重要提醒 |
1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2.在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3.传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4.运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 |
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到货须知 |
1.收到细胞后，首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照（当天以及第 2,3 天请拍照），记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据)；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
3.由于运输的原因，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。 |
| 四、售后服务 |
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重发标准 |
1.细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；
2.收到细胞未开封，如出现污染状况，重发；
3.收到细胞3天内，发现污染问题，经核实后，重发；
4.常温发货的细胞静置 2 小时后，绝大多数细胞未存活，经核实后，重发；
5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封，出现污染，经核实后，重发；
6.细胞活性问题，请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，经核实后，重发；
7.视具体情况而定。 |
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不予重发 |
1.客户操作造成细胞污染，不重发；
2.客户严重操作失误致细胞状态不好，不重发；
3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
4.细胞状态不好，未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片，不重发；
5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的，不重发；
6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的，不重发；
7.视具体情况而定。 |
