TRAF2 knockout HeLa cell line

补充内容

TRAF2（TNF receptor-associated factor 2）是一种在细胞信号传导中起重要作用的蛋白质。它属于TRAF家族，这个家族的蛋白质与TNF（肿瘤坏死因子）受体信号通路密切相关。TRAF2是这个家族的第二个成员，它在接收到TNF受体激活的信号后，能够调节细胞内的多种生物学过程，包括细胞凋亡、炎症反应和抗病毒应答等。 TRAF2蛋白在细胞内作为接头蛋白，能够连接TNF受体和下游的信号分子，如IKK（IκB激酶）复合物，从而参与调控NF-κB（核因子κB）的活性。NF-κB是一个转录因子，它能够调节多种与炎症和细胞生存相关的基因的表达。 TRAF2的异常表达或功能失调与多种疾病有关，包括癌症、自身免疫疾病和炎症性疾病。因此，TRAF2是一个重要的药物靶点，研究人员正在探索针对TRAF2的治疗方法，以治疗相关疾病。

1.细胞株的建立和扩增：从含有TNF受体相关信号通路的正常细胞中获取细胞株，进行培养和扩增。 

2.基因编辑工具的选择：通常使用CRISPR-Cas9系统或ZFNs进行基因编辑。这些工具可以识别和替换特定的DNA序列，以创建TRAF2基因敲除细胞系。 

3.设计并构建CRISPR/Cas9或ZFNs载体：根据TRAF2基因的序列，设计相应的靶点，并将这些靶点编码的基因片段插入载体中。载体需要能够将基因片段插入到细胞的基因组中，以便进行基因编辑。 

4.细胞转化：将构建好的载体通过特定的转染或转化方法将载体导入细胞中，使其能够在细胞中表达其包含的基因片段。 

5.基因编辑检测和筛选：在转化后的细胞中，使用分子检测方法来验证基因是否被成功编辑。编辑后的细胞可能会表现出生存率降低、对特定刺激反应变化等表型变化，这些变化可以被用来筛选和分离出编辑成功的细胞株。 

6. 稳定遗传的细胞株构建：经过多次传代和筛选后，基因编辑的改变会在细胞中持续存在，形成稳定的遗传细胞株。

Species

Gene ID

GenBank Accession

Transcript

Human (Homo sapiens)

TRAF2

NM_003177.7

NP_066961.2