第八课:多因素分析条件性重编程的角质生成细胞:角质生成细胞在体外与辐照的3T3基底细胞(J2)以及生长因子的作用,角质生成细胞能够获得持续的增殖能力并形成类似于"永生化"的结果。条件性重编程的细胞表达成熟干细胞的但是却有别于胚胎干细胞和诱导的多能性干细胞。为此,作者希望通过基因表达和功能性的siRNA敲除验证等方法验证条件性重编程细胞的变化...
阅读详情第七课:Y-27632依赖的转录组变化能够促进气管祖细胞克隆的形成:呼吸道表皮是呼吸系统和外界环境接触的直接界面,呼吸道表皮细胞的异常会导致肺部疾病,例如哮喘,慢性阻碍性肺病等。关于呼吸道疾病的研究常原代肺的表皮细胞进行培养,但是其最大的弊端是获得细胞数少。然而,近期报道的条件性重编程技术则很好的解决了这个问题...
阅读详情第六课:拟永生化产后耳蜗组细胞产生足量细胞系且具有调控毛细胞转录的能力:听觉毛细胞(HC)是耳蜗中机械感应细胞对听力具有至关重要的作用;毛细胞是高度分化且丰度较低的一类细胞,每个小鼠耳蜗仅有3300个毛细胞;毛细胞分为内毛细胞(IHC)和外毛细胞(OHC);OHC是电动的而且起耳蜗放大器的作用。然而OHC的电动性由prestin蛋白决定;但是,关于prestin蛋白的调控却研究较少,主要原因在于缺乏合适研究prestin的系统...
阅读详情第五课:从原发性组织切除物开发原位人类乳腺管癌的体外模型:乳腺管癌是0阶段的乳腺癌由异常增殖的表皮细胞侵入乳腺管而形成,目前为止只有两株商业化的细胞系用于研究原位乳腺管癌:SUM225CWNa和MCF10DCIS.COM。所以,作者利用最近报道的条件性重编程技术体外培养临床上获得的原位乳腺管癌样品...
阅读详情第四课:重编程人的内皮细胞至造血干细胞需要血管的诱导视频:在本篇研究中,作者发现一套转录因子的组合能够使人的脐带内皮细胞和成人真皮微血管内皮细胞转化为具有多功能干性的造血细胞,内皮细胞的诱导需要无血清血管细胞小室的辅助...
阅读详情条件性重编程的正常的和原代癌变的前列腺表皮细胞: 一个由病人细胞诱导的用于研究前列腺癌的全新细胞模型视频:前列腺癌症是在美国男性中最常见的癌症,借助于最近建立的2D的条件性重编程培养和3D的类器官培养技术,为建立体外的人的细胞模型提供助力,利用条件性重编程培养技术,有利于为建立特异性药物筛选系统...
阅读详情Rho 激酶抑制剂能够有效永生化人的角质生成细胞:研究结果表明,ROCK抑制剂能够影响角质生成细胞的增殖和分化.在没有ROCK抑制剂Y-27632的存在下,这三类细胞在培养20-40代时到达平台期,无法继续增殖.当加入Y-27632之后,细胞在有限的培养代数下,未见平台期的形成...
阅读详情ROCK 抑制剂和基底细胞共同诱导表皮细胞的条件性重编程:Richard Schlegel团队利用基底细胞和Rho相关激酶抑制剂Y-27632成功在体外扩增原代人的角质形成细胞.若无基底细胞仅存在合成培养基的情况下能产生有限的非角质细胞,但是这些细胞不能无限增殖...
阅读详情细胞冻存步骤视频操作:1.将细胞培养皿放入超净工作台,吸去上清,沿皿壁加入5ml PBS,轻洗细胞表面,洗去表面培养基,再将PBS吸去;2.加入2ml胰酶,37℃消化1-2分钟,显微镜下观察细胞是否脱落,可轻拍使未脱落细胞脱落加入3ml 完全培养基终止消化,将细胞吹散,移入15ml离心管中,1000rpm,离心5min等等,最后直接将细胞放入-80度冰箱中,24h后可移入液氮中保存...
阅读详情贴壁细胞传代培养视频步骤:1:将细胞培养皿放入超净工作台中,吸去上清,沿血壁加入5ml PBS;2:轻洗细胞表面,洗去表面培养基,再将PBS弃去;3:加入2ml胰酶,37℃消化1-2分钟,显微镜下观察细胞是否脱落;4:加入3ml完全培养基终止消化,将细胞吹散,移入15ml离心机管中,1000rpm,离心5min等,最后把培养皿放入C02培养箱中培养,第二天观察贴壁情况...
阅读详情细胞复苏视频步骤:1.从液氮罐中迅速取出冻存管,立即放入37°C水浴箱中;2.轻轻摇晃,使细胞快速融化解冻,最好在1min内完成;3.将冻存管移入离心机中1000rpm离心3min;4.取4mL完全培养基到一个新的6cm培养皿中,在培养皿上标记细胞名称,日期和所用培养基名称;6.从冻存管中吸走上清,用1ml完全培养基重悬后,移入6cm皿中,最后把培养皿放入C02培养箱中培养,第二天观察贴壁情况...
阅读详情冻存细胞运输收货处理视频操作步骤:1.提前打开水浴锅设置37C,将取出的冻存管迅速放入37C水浴锅中,轻轻摇晃,使细胞快速融化解冻2.将冻存管移入离心机中1000rpm离心3min3.取3mL完全培养基到一个新的6cm培养皿中,在培养皿上标记细胞名称,日期和所用培养基名称4.离心后,以75%酒精喷冻存管外部,移入无菌操作台内,从冻存管中吸走上清,把培养皿放入C02培养箱中培养,第二天观察贴壁情况...
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