一、细胞基本属性 | |||||
产品名称 | Caspase 9 knockout HeLa cell line | ||||
产品货号 | IMKO-H006 | ||||
产品规格 | 1×106cells/T25或1mL冻存管 | ||||
储存及运输 | 干冰运输;储存在液氮中 | ||||
产品分类 | Hela细胞 | ||||
物种 | 人 | ||||
修饰基因 | Caspase 9 | ||||
修饰类型 | 基因敲除 | ||||
转导方法 | CRISPR/Cas9 | ||||
克隆类型 | 纯化克隆 | ||||
细胞鉴定 | 通过遗传学方法确认Caspase 9基因敲除 | ||||
细胞形态 | 上皮细胞样 | ||||
生长特性 | 贴壁生长 | ||||
培养体系 | 90%MEM+10% FBS+1%PS | ||||
传代比例 | 1:2至1:3 | ||||
传代周期 | 每周3次 | ||||
培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ | ||||
冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 | ||||
补充内容 | Caspase 9是一种蛋白酶,属于半胱氨酸蛋白酶家族,也被称为CASP9。Caspase 9在细胞凋亡中起着重要作用,主要参与调节内源性凋亡通路。作为一个执行者Caspase,Caspase 9的激活可以引发细胞凋亡的执行阶段,从而导致细胞死亡。这个过程通常是通过Caspase级联反应来实现的,其中Caspase 9被激活后会激活下游的Caspase蛋白。 Caspase 9被认为是凋亡通路中的一个关键分子,能够响应凋亡信号并启动细胞死亡程序。在多种生物学进程中,Caspase 9都扮演着重要角色,例如细胞周期调控、DNA修复、细胞发育等。Caspase 9的异常表达或突变与多种疾病的发生和发展相关,包括肿瘤、神经退行性疾病等。 | ||||
构建方法 | |||||
Caspase 9基因敲除细胞系的构建通常涉及的步骤 | 1.选择合适的sgRNA序列,能够靶向Caspase 9基因的特定区域,在CRISPR/Cas9系统中引导Cas9蛋白进行基因编辑。 2.使用CRISPR/Cas9系统,将设计好的sgRNA和Cas9蛋白导入目标细胞内,使Cas9蛋白与sgRNA结合,形成复合物,精准切割Caspase 9基因。 3.使用PCR、测序等技术验证Caspase 9基因是否成功被敲除,确认基因编辑效果。 4.将进行基因敲除的细胞进行筛选和克隆,获得敲除Caspase 9基因的纯合细胞系。 5.对敲除Caspase 9基因的细胞系进行功能验证实验,例如观察细胞凋亡、增殖等功能的变化,以验证Caspase 9基因缺失对细胞功能的影响。 6. 分析实验结果,撰写报告并记录Caspase 9基因敲除细胞系的构建过程及相应功能验证实验结果。 | ||||
Caspase 9基因的基本信息 | Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
Human (Homo sapiens) | CASP9 | 842 | NM_001229.5 | NP_001220.2 | |
关于基因 | Official Symbol | CASP9 | |||
Previous Symbol | CASP9 | ||||
Official Full Name | Caspase 9 | ||||
Synonyms | MCH6, APAF3, APAF-3, PPP1R56, ICE-LAP6 | ||||
Location | 1p36.21 | ||||
Gene Type | Protein-coding gene | ||||
Uniprot ID | B4E1A3, O95348, P55211, Q53Y70, Q5JRU9, Q5UGI1, Q92852, Q9BQ62, Q9UEQ3, Q9UIJ8 | ||||
Pathway/Library | TNFR1 Pathway, Apoptosis and survival FAS signaling cascades | ||||
Gene Summary | This gene encodes a member of the cysteine-aspartic acid protease (caspase) family. Sequential activation of caspases plays a central role in the execution-phase of cell apoptosis. Caspases exist as inactive proenzymes which undergo proteolytic processing at conserved aspartic residues to produce two subunits, large and small, that dimerize to form the active enzyme. This protein can undergo autoproteolytic processing and activation by the apoptosome, a protein complex of cytochrome c and the apoptotic peptidase activating factor 1; this step is thought to be one of the earliest in the caspase activation cascade. This protein is thought to play a central role in apoptosis and to be a tumor suppressor. Alternative splicing results in multiple transcript variants. [provided by RefSeq, May 2013] |
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