| 一、细胞基本属性 | |||||
| 产品名称 | PSMD4 knockout HeLa cell line | ||||
| 产品货号 | IMKO-H013 | ||||
| 产品规格 | 1×106cells/T25或1mL冻存管 | ||||
| 储存及运输 | 干冰运输;储存在液氮中 | ||||
| 产品分类 | Hela细胞 | ||||
| 物种 | 人 | ||||
| 修饰基因 | PSMD4 | ||||
| 修饰类型 | 基因敲除 | ||||
| 转导方法 | CRISPR/Cas9 | ||||
| 克隆类型 | 纯化克隆 | ||||
| 细胞鉴定 | 通过遗传学方法确认PSMD4基因敲除 | ||||
| 细胞形态 | 上皮细胞样 | ||||
| 生长特性 | 贴壁生长 | ||||
| 培养体系 | 90%MEM+10% FBS+1%PS | ||||
| 传代比例 | 1：2至1：3 | ||||
| 传代周期 | 每周3次 | ||||
| 培养条件 | 气相：95%空气+5%二氧化碳;温度：37℃ | ||||
| 冻存条件 | 无血清冻存液，液氮储存 | ||||
补充内容 | PSMD4在多种实体肿瘤中上调，包括肝细胞癌(HCC)，其存在与细胞增殖、Akt/GSK-3β/环氧化酶2(COX2)途径的激活、抑制p53启动子活性以及p53降解增加等因素有关。PSMD4通过Akt/COX2途径和p53抑制推动肝细胞癌的进展。PSMD4通过蛋白水解途径中的泛素介导和蛋白酶体介导蛋白降解，促进细胞增殖，与肝细胞癌的发展密切相关。 研究发现，PSMD4过度表达在HCC组织和细胞系中确定，通过Northern blot、Western blot和免疫组化技术。沉默PSMD4可阻止细胞增殖和肿瘤生长，诱导细胞凋亡。进一步的研究表明，PSMD4的阻断能够抑制肝细胞癌的发生。 | ||||
| 构建方法 |  | ||||
| PSMD4基因敲除细胞系的构建通常涉及的步骤 | 1.选择合适的靶向PSMD4基因的sgRNA序列，通常利用在线工具设计合适的sgRNA序列。 2.合成设计好的sgRNA序列，通常通过化学合成来制备。 3.将合成的sgRNA和Cas9蛋白转染入目标细胞内，使其形成编辑复合物。 4.使用适当的筛选方法（如阳性筛选标记物）筛选出成功编辑的细胞。 5.对成功编辑的细胞进行单克隆化，并验证PSMD4基因的敲除效果，通常通过PCR、Western blot等方法进行验证。 6. 对PSMD4敲除细胞系进行功能验证，如观察细胞增殖、凋亡等生物学特征的变化，评估PSMD4基因敲除对细胞功能的影响。 | ||||
| PSMD4基因的基本信息 | Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
Human (Homo sapiens) | PSMD4 | 5710 | NM_001330692.2 | NP_001317621.1 | |
| 关于基因 | Official Symbol | PSMD4 | |||
| Previous Symbol | PSMD4 | ||||
| Official Full Name | Proteasome 26S subunit ubiquitin receptor, non-ATPase 4 | ||||
| Synonyms | Rpn10, S5A, AF, AF-1 | ||||
| Location | 1q21.3 | ||||
| Gene Type | Protein Coding | ||||
| Uniprot ID | Q5VWC4 | ||||
| Pathway/Library | Regulation of activated PAK-2p34 by proteasome mediated degradation, Assembly of the pre-replicative complex | ||||
| Gene Summary | The 26S proteasome is a multicatalytic proteinase complex with a highly ordered structure composed of 2 complexes, a 20S core and a 19S regulator. The 20S core is composed of 4 rings of 28 non-identical subunits; 2 rings are composed of 7 alpha subunits and 2 rings are composed of 7 beta subunits. The 19S regulator is composed of a base, which contains 6 ATPase subunits and 2 non-ATPase subunits, and a lid, which contains up to 10 non-ATPase subunits. Proteasomes are distributed throughout eukaryotic cells at a high concentration and cleave peptides in an ATP/ubiquitin-dependent process in a non-lysosomal pathway. An essential function of a modified proteasome, the immunoproteasome, is the processing of class I MHC peptides. This gene encodes one of the non-ATPase subunits of the 19S regulator lid. Pseudogenes have been identified on chromosomes 10 and 21. [provided by RefSeq, Jul 2008] | ||||
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