细胞基本属性 | |||||
产品名称 | Bim knockout HeLa cell line | ||||
产品货号 | IMKO-H021 | ||||
产品规格 | 1×106cells/T25或1mL冻存管 | ||||
储存及运输 | 干冰运输;储存在液氮中 | ||||
产品分类 | Hela细胞 | ||||
物种 | 人 | ||||
修饰基因 | Bim | ||||
修饰类型 | 基因敲除 | ||||
转导方法 | CRISPR/Cas9 | ||||
克隆类型 | 纯化克隆 | ||||
细胞鉴定 | 通过遗传学方法确认Bim基因敲除 | ||||
细胞形态 | 上皮细胞样 | ||||
生长特性 | 贴壁生长 | ||||
培养体系 | 90%MEM+10%FBS+1%PS | ||||
传代比例 | 1:2至1:3 | ||||
传代周期 | 每周3次 | ||||
培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ | ||||
冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 | ||||
补充内容 | Bim是Bcl-2相互作用的细胞死亡调节蛋白,属于Bcl-2家族中的BH3-only亚家族成员。Bim在细胞凋亡中发挥关键作用,是活性最强的促凋亡蛋白之一。Bim蛋白的低表达与许多肿瘤的发生、发展和预后相关,因此成为肿瘤治疗中的重要研究对象。研究表明,Bim蛋白能够通过其上调引起带有EGFR突变的肺癌细胞的凋亡。 | ||||
构建方法 | |||||
Bim基因敲除细胞系构建通常涉及的步骤 | 1.设计敲除基因的引物:通过基因编辑技术(如CRISPR-Cas9系统)设计引物,使其靶向Bim基因的特定区域,引导Cas9蛋白和RNA修饰因子使Bim基因发生敲除。 2.转染敲除系统:将设计好的敲除基因引物转染至目标细胞系,使其内部表达敲除基因,并引导细胞系对Bim基因进行编辑。 3.筛选阳性细胞系:利用特定标记技术(如荧光标记、抗生素耐受性等)筛选出成功编辑Bim基因的阳性细胞系。 4.确认敲除效果:通过PCR、Western blot等技术检测目标细胞系Bim基因的敲除效果,验证细胞系中Bim基因的表达是否被成功抑制或敲除。 5.功能验证:进一步通过细胞凋亡、增殖、转移等功能性实验验证Bim基因敲除对目标细胞系生物学行为的影响,评估Bim基因在细胞凋亡调节中的作用。 | ||||
Bim基因的基本信息 | Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
Human (Homo sapiens) | Bim | 10018 | NP_619527 | NP_619527.1 | |
关于基因 | Official Symbol | BCL2L11 | |||
Previous Symbol | BCL2L11 | ||||
Official Full Name | BCL2 like 11 | ||||
Synonyms | BIM, BAM, BOD | ||||
Location | 2q13 | ||||
Gene Type | Protein Coding | ||||
Uniprot ID | A8K2W2, O43521, O43522, Q0MSE7, Q0MSE8, Q0MSE9, Q53R28, Q6JTU6, Q6T851, Q6TE14, Q6TE15, Q6TE16, Q6V402, Q8WYL6, Q8WYL7, Q8WYL8, Q8WYL9, Q8WYM0, Q8WYM1 | ||||
Pathway/Library | The pathways involved include apoptosis pathways, Bcl-2 family signaling pathways, and pathways related to cancer. | ||||
Gene Summary | Enables dynein complex binding activity; microtubule binding activity; and protein kinase binding activity. Involved in response to endoplasmic reticulum stress. Acts upstream of or within several processes, including animal organ development; apoptotic signaling pathway; and lymphocyte homeostasis. Located in mitochondrion. Is extrinsic component of membrane. Part of Bcl-2 family protein complex. Is expressed in brain; hair outer root sheath; metanephros; spleen; and trunk unsegmented mesenchyme. Orthologous to human BCL2L11 (BCL2 like 11). [provided by Alliance of Genome Resources, Apr 2022] |
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