| 细胞基本属性 | |||||
| 产品名称 | GSDME knockout THP-1 cell line | ||||
| 产品货号 | IMKO-H042 | ||||
| 产品规格 | 1×106cells/T25或1mL冻存管 | ||||
| 储存及运输 | 干冰运输;储存在液氮中 | ||||
| 产品分类 | THP-1细胞 | ||||
| 物种 | 人 | ||||
| 修饰基因 | GSDME | ||||
| 修饰类型 | 基因敲除 | ||||
| 转导方法 | CRISPR/Cas9 | ||||
| 克隆类型 | 纯化克隆 | ||||
| 细胞鉴定 | 通过遗传学方法确认GSDME基因敲除 | ||||
| 细胞形态 | 上皮细胞样 | ||||
| 生长特性 | 贴壁生长 | ||||
| 培养体系 | 90%MEM+10% FBS+1%PS | ||||
| 传代比例 | 1：2至1：3 | ||||
| 传代周期 | 每周3次 | ||||
| 培养条件 | 气相：95%空气+5%二氧化碳;温度：37℃ | ||||
| 冻存条件 | 无血清冻存液，液氮储存 | ||||
|
补充内容 |
气孔素E（GSDME）是一种能够将非炎症性细胞凋亡转化为焦亡的孔形成蛋白的前体。GSDME的中文名称为气孔素E。该蛋白构成了成孔蛋白的前体，在裂解后释放的N端部分移动到质膜，与膜结合形成内径为10-15纳米的孔，从而引发细胞焦亡的生理功能。 研究揭示了GSDME的全新生理功能及其内源激活机制，阐明了细胞焦亡在肿瘤免疫中的重要作用，为肿瘤治疗提供了新的思路。研究发现，Gasdermin E通过控制中性粒细胞的死亡方式来影响炎症反应的发生。在中性粒细胞中，GSDME的功能是通过蛋白酶3和caspase-3介导的严格调节的裂解和激活，在老化中性粒细胞中导致焰症的发生。GSDME的缺陷并不会改变中性粒细胞的整体状态。 另外，研究还表明GSDME可被caspase-3特异性切割并激活，从而导致焦亡的发生。这一发现改变了人们对程序性细胞死亡的理解。此外，一些研究指出，在阿尔茨海默病中，GSDME在细胞焦亡中的介入可能对病情有着重要作用。 | ||||
| 构建方法 |
|
||||
| GSDME基因敲除细胞系构建通常涉及的步骤 |
1.设计携带敲除基因的质粒载体，通常包括带有靶向GSDME基因的gRNA序列和Cas9蛋白的表达序列。 2.使用目标细胞系（通常是人类细胞系）进行细胞培养，确保细胞状态良好。 3.利用适当的转染方法（例如化学转染、电穿孔法、病毒载体转染等），将设计好的敲除载体转染到目标细胞中。 4. 使用适当的筛选方法（例如利用抗生素抗性基因）筛选出成功敲除了GSDME基因的细胞。 5. 对筛选得到的细胞进行PCR、Western blot等实验验证GSDME基因是否被成功敲除。 6. 进行功能实验，比如观察敲除细胞的凋亡、焦亡等特性，验证GSDME的敲除对细胞生物学过程的影响。 7. 将已验证的敲除细胞系扩增并保存，以备进一步的研究或实验使用。 |
||||
| GSDME基因的基本信息 |
Species |
Gene Symbol |
Gene ID |
GenBank Accession |
Transcript |
|
Human (Homo sapiens) |
GSDME |
1687 |
NM_004403.3 |
NP_004394.1 |
|
| 关于基因 | Official Symbol | GSDME | |||
| Previous Symbol | DFNA5; ICERE-1 | ||||
| Official Full Name | Gasdermin E | ||||
| Synonyms | DFNA5, ICERE-1 | ||||
| Location | 7p15.3 | ||||
| Gene Type | Protein-coding | ||||
| Uniprot ID | ENSP00000339587 | ||||
| Pathway/Library | Apoptin induces pyroptosis of colorectal cancer cells via the GSDME-dependent pathway | ||||
| Gene Summary | Hearing impairment is a heterogeneous condition with over 40 loci described. The protein encoded by this gene is expressed in fetal cochlea, however, its function is not known. Nonsyndromic hearing impairment is associated with a mutation in this gene. Three transcript variants encoding two different isoforms have been found for this gene. [provided by RefSeq, Jul 2008] | ||||
相关问题
培养指南
-
hiPSC人诱导多能干细胞培养教程:在培养hiPSC细胞前,需准备好hESC/iPSC完全培养基配制和Matrigel铺板,hiPSC人诱导多能干细胞复苏操作,1. 将水浴锅预热至37℃;并将Matrigel包被的6孔板,提前放置生物安全柜中约1小时恢复···...
阅读详情 -
H9人胚胎干细胞培养条件与方法:1. 将水浴锅预热至37℃,并将Matrigel包被的6孔板,提前放置生物安全柜中约1小时恢复至室温(15~30℃);2. 取4 mL hESC/iPSC完全培养基,按照1:4000比例加入1 μL的hESC/iPSC Supplement C,···...
阅读详情 -
H1人胚胎干细胞培养指南:在培养h1干细胞之前,首先要准备好hESC/iPSC完全培养基配制, 铺板,H1人胚胎干细胞复苏步骤：1.将水浴锅预热至37℃;并将Matrigel包被的6孔板,提前放置生物安全柜中约1小时恢复至室温(15~30℃);···...
阅读详情 -
4T1细胞培养方法:小鼠乳腺癌4T1细胞培养基 90%DMEM+10% FBS+PS,生长条件：气相：95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃,4T1细胞形态特征为上皮细胞样,贴壁生长,如果4T1细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养,传代方法:1:2至1:3···...
阅读详情 -
常用人肝癌细胞系有哪些及如何选择:目前较为常用的几株人肝癌细胞系SMMC-7721、Bel-7402、MHCC97、HepG2、Hep3B、Huh-7 and PLC/PRF/5,那么人肝癌细胞株如何选择呢?一方面你可以查找相关的文献,另一方面可以考虑选择···...
阅读详情 -
HL-60细胞生长慢解决方法及如何养好:当HL-60细胞传代后生长速度慢且状态不佳时,可竖着培养直到培养基变黄,待细胞密度起来后,状态会有所好转,同时,若HL-60细胞状态很差,可采用半换液的方式：以T25瓶子为例,瓶子里有5m···...
阅读详情
