细胞基本属性 | |||||
产品名称 | CBL knockout HeLa cell line | ||||
产品货号 | IMKO-H030 | ||||
产品规格 | 1×106cells/T25或1mL冻存管 | ||||
储存及运输 | 干冰运输;储存在液氮中 | ||||
产品分类 | 293T细胞 | ||||
物种 | 人 | ||||
修饰基因 | CBL | ||||
修饰类型 | 基因敲除 | ||||
转导方法 | CRISPR/Cas9 | ||||
克隆类型 | 纯化克隆 | ||||
细胞鉴定 | 通过遗传学方法确认CBL基因敲除 | ||||
细胞形态 | 上皮细胞样 | ||||
生长特性 | 贴壁生长 | ||||
培养体系 | 90%MEM+10% FBS+1%PS | ||||
传代比例 | 1:2至1:3 | ||||
传代周期 | 每周3次 | ||||
培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ | ||||
冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 | ||||
补充内容 | CBL(Caskin-like binding protein)基因,全称为CASK-like binding protein,是一个编码E3泛素连接酶的基因,属于原癌基因家族。E3泛素连接酶是一类重要的蛋白质,能够将泛素(ubiquitin)分子添加到目标蛋白上,这一过程称为泛素化,是细胞内蛋白质降解和信号转导调控的重要机制。 CBL基因编码的蛋白质包含一个RING finger结构域,这是E3泛素连接酶的关键结构,能够促进泛素从泛素结合酶(E2)转移到特定底物上。此外,CBL蛋白还含有一个N端磷酸酪氨酸结合域,可以与被酪氨酸激酶活化的蛋白质相互作用,并将它们标记为蛋白酶体降解的靶点。因此,CBL在多种信号转导途径中起到负调节器的作用。 在癌症研究中,CBL基因的突变和异常表达与多种人类癌症的发生发展有关,包括急性髓系白血病(AML)。CBL基因的突变有时也会导致努南综合征样疾病,这是一种遗传性疾病,表现为生长迟缓、发育异常和智力障碍等症状。 | ||||
构建方法 | |||||
CBL基因敲除细胞系构建通常涉及的步骤 | 1.细胞株的建立:首先需要选择合适的细胞株进行培养,并建立稳定的培养环境。 2.克隆筛选:通过添加相应的筛选试剂,对特定的突变细胞进行克隆,并对其进行显微镜检查。 3.细胞生长和基因表达分析:在培养过程中,需要对细胞的生长情况和基因表达情况进行监测和分析,以确保细胞的正常生长和突变细胞的稳定表达。 4.基因敲除细胞的筛选和鉴定:在基因敲除细胞培养过程中,需要筛选出含有CBL基因突变体的细胞,并进行鉴定和分析。 5. 建立稳定细胞株:经过基因敲除筛选和鉴定的细胞,需要进行长时间的稳定培养,并确认其稳定性、一致性和适应度,以形成稳定细胞株。 | ||||
CBL基因的基本信息 | Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
Human (Homo sapiens) | CBL | 867 | NM_005188.4 | NP_005179.2 | |
关于基因 | Official Symbol | CBL | |||
Previous Symbol | CBL | ||||
Official Full Name | Casitas B-lineage Lymphoma | ||||
Synonyms | RNF55 | ||||
Location | 11q23.3 | ||||
Gene Type | proto-oncogene | ||||
Uniprot ID | A3KMP8, P22681 | ||||
Pathway/Library | RTK | ||||
Gene Summary | This gene is a proto-oncogene that encodes a RING finger E3 ubiquitin ligase. The encoded protein is one of the enzymes required for targeting substrates for degradation by the proteasome. This protein mediates the transfer of ubiquitin from ubiquitin conjugating enzymes (E2) to specific substrates. This protein also contains an N-terminal phosphotyrosine binding domain that allows it to interact with numerous tyrosine-phosphorylated substrates and target them for proteasome degradation. As such it functions as a negative regulator of many signal transduction pathways. This gene has been found to be mutated or translocated in many cancers including acute myeloid leukaemia, and expansion of CGG repeats in the 5' UTR has been associated with Jacobsen syndrome. Mutations in this gene are also the cause of Noonan syndrome-like disorder. [provided by RefSeq, Jul 2016] |
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