PFKP knockout THP-1 cell line

补充内容

PFKP（磷酸果糖激酶1）是一种在糖酵解途径中起关键作用的酶，它催化6-磷酸果糖转化为果糖-2,6-二磷酸，这是糖酵解途径中的一个关键步骤。PFKP主要在肝脏和肌肉细胞中表达，并且在调节糖酵解途径的速率中发挥重要作用。 PFKP的活性受到多种因素的影响，包括葡萄糖的浓度、ATP的可用性和细胞内的pH值。此外，PFKP的表达和活性在不同的细胞类型和生理条件下可能有所不同，例如在胰岛素抵抗和糖尿病等代谢性疾病中，PFKP的活性可能会增加。 在实验室研究中，PFKP通常作为糖酵解途径的一个标志物，用于研究细胞内葡萄糖代谢的调控。此外，PFKP的过表达或缺失模型被用于研究其在肿瘤生长和葡萄糖代谢中的作用。 PFKP基因敲除模型用于研究其在体内的功能。这些模型显示，PFKP的缺失会导致糖酵解途径的改变，影响细胞的生长和代谢。 在临床研究中，PFKP的表达和活性可以作为诊断和监测代谢性疾病进展的指标。通过深入了解PFKP的功能和作用，科学家们希望能够开发出新的治疗方法来治疗与糖酵解和葡萄糖代谢相关的疾病。

1.设计敲除序列：设计特定的DNA序列，这些序列可以与PFKP基因的靶位点结合，从而导致基因的敲除。 

2.构建表达载体：将设计的sgRNA序列和Cas9基因克隆到表达载体中，这个载体将被转染到目标细胞中。 

3.细胞转染：将构建的表达载体通过化学方法或病毒载体系统转入目标细胞中。 

4.基因编辑：Cas9酶在sgRNA的引导下识别并切割目标基因，导致DNA断裂。 

5.筛选和验证：通过PCR、测序或特定的分子标记来确认是否成功敲除PFKP基因。 

6.功能分析：对敲除PFKP基因的细胞进行功能分析，以评估基因敲除对细胞代谢、生长和分化的影响。 

7. 稳定细胞系的建立：经过验证的敲除细胞会继续培养，以建立稳定的细胞系。 

Species

Gene ID

GenBank Accession

Transcript

Human (Homo sapiens)

PFKP

NM_001242339.2

NP_001229268.1