细胞基本属性 | |||||
产品名称 | APAF1 knockout HeLa cell line | ||||
产品货号 | IMKO-H016 | ||||
产品规格 | 1×106cells/T25或1mL冻存管 | ||||
储存及运输 | 干冰运输;储存在液氮中 | ||||
产品分类 | Hela细胞 | ||||
物种 | 人 | ||||
修饰基因 | APAF1 | ||||
修饰类型 | 基因敲除 | ||||
转导方法 | CRISPR/Cas9 | ||||
克隆类型 | 纯化克隆 | ||||
细胞鉴定 | 通过遗传学方法确认APAF1基因敲除 | ||||
细胞形态 | 上皮细胞样 | ||||
生长特性 | 贴壁生长 | ||||
培养体系 | 90%MEM+10% FBS+1%PS | ||||
传代比例 | 1:2至1:3 | ||||
传代周期 | 每周3次 | ||||
培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ | ||||
冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 | ||||
补充内容 | APAF1(凋亡蛋白激活因子-1)是一种人类蛋白,与线虫CED-4基因同源。它在细胞色素C和dATP存在的情况下被发现是卡酶-3的激活因子。APAF1在凋亡途径中扮演关键角色,形成大复合物——凋亡体,进而招募和激活线粒体途径中的启动卡酶-9。研究发现,APAF1的沉默可以降低膀胱癌细胞对顺铂化疗的敏感性。此外,环状RNA Cdr1as可以直接结合miR-1270,消除其对APAF1的作用。EV71通过3C蛋白- hnRNPA1-APAF1-卡酶-3-凋亡轴的机制释放病毒。APAF1在多种疾病中发挥作用,如肺癌和过渡性细胞癌。进一步的分析发现APAF1的功能与其在凋亡和生存FAS信号级联中的作用有关。 研究表明,APAF1在细胞死亡的内在或线粒体途径中起着关键作用,通过在胞色素c释放后寡聚化并形成凋亡体的大复合物来调节这一过程。凋亡体可以招募和激活线粒体途径的启动卡酶-9,从而引发细胞凋亡。APAF1的沉黙可降低膀胱癌细胞对顺铂化疗的敏感性,这表明APAF1在调节肿瘤细胞对化疗药物的反应中起着重要作用。此外,环状RNA Cdr1as介导的miR-1270对APAF1的影响也揭示了一种新的细胞死亡调控机制。在EV71病毒释放过程中,APAF1与其他蛋白质的相互作用形成复杂的调控网络,影响病毒复制和放出。APAF1还与多种疾病的发生和发展相关,如肺癌和过渡性细胞癌,提示其可能是一种潜在的治疗靶点。 | ||||
构建方法 | ![]() | ||||
APAF1基因敲除细胞系的构建通常涉及的步骤 | 1.设计小干扰RNA(siRNA)或锤子核酸(shRNA)针对APAF1基因的敲除:通过生物信息学工具设计针对APAF1基因的siRNA或shRNA序列,以达到特异性敲除APAF1的目的。 2.转染siRNA或shRNA至目标细胞系:将设计好的siRNA或shRNA转染至目标细胞系中,使其介导对APAF1基因的敲除作用。 3.筛选和确认敲除细胞系:使用特定的筛选方法(如荧光显微镜观察、PCR、Western blot等)确认敲除细胞系中APAF1基因的敲除效果。 4.鉴定APAF1敲除细胞系的功能变化:分析敲除细胞系的凋亡信号通路、增殖能力、细胞周期、细胞凋亡等功能的变化,以验证APAF1在这些细胞过程中的作用。 5. 进一步研究APAF1敲除细胞系的机制:深入研究APAF1基因敲除对细胞生物学特性的影响,探究APAF1在细胞凋亡途径中的作用机制,并进一步探索其在疾病发生发展中的潜在作用。 | ||||
APAF1基因的基本信息 | Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
Human (Homo sapiens) | APAF1 | 317 | NM_181861.2 | NP_863651.1 | |
关于基因 | Official Symbol | APAF1 | |||
Previous Symbol | CED4; APAF-1 | ||||
Official Full Name | Apoptotic Peptidase Activating Factor 1 | ||||
Synonyms | APAF-1, CED4 | ||||
Location | 12q23.1 | ||||
Gene Type | Protein Coding | ||||
Uniprot ID | B2RMX8, O14727, O43297, Q7Z438, Q9BXZ6, Q9UBZ5, Q9UGN8, Q9UGN9, Q9UGP0, Q9UJ58, Q9UJ59, Q9UJ60, Q9UJ61, Q9UJ62, Q9UJ63, Q9UJ64, Q9UJ65, Q9UJ66, Q9UJ67, Q9UNC9 | ||||
Pathway/Library | TNFR1 Pathway, Apoptosis, Survival FAS Signaling Cascades | ||||
Gene Summary | This gene encodes a cytoplasmic protein that initiates apoptosis. This protein contains several copies of the WD-40 domain, a caspase recruitment domain (CARD), and an ATPase domain (NB-ARC). Upon binding cytochrome c and dATP, this protein forms an oligomeric apoptosome. The apoptosome binds and cleaves caspase 9 preproprotein, releasing its mature, activated form. Activated caspase 9 stimulates the subsequent caspase cascade that commits the cell to apoptosis. Alternative splicing results in several transcript variants encoding different isoforms. [provided by RefSeq, Jul 2008] |
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