GSDMD knockout HeLa cell line

补充内容

GSDMD是gasdermin家族中的一员，这个家族的成员广泛表达并可能在不同组织中发挥着特异性作用。研究人员一直在努力确定GSDMD家族成员的结构和功能，并已取得了一些进展。通过了解GSDMD的蛋白功能、特性、表达、定位以及翻译后修饰等特质，可以更好地理解其在细胞焦亡信号通路中的作用。 在研究中发现，针对GSDMD和相关蛋白作为靶点开发药物可能有助于治疗某些疾病。因此，对GSDMD介导细胞焦亡的机制进行深入研究对于认识其在疾病发展中的作用至关重要。通过结合CRISPR/Cas9系统等技术，研究人员可以对GSDMD基因进行敲除以构建细胞模型，从而更深入地探索GSDMD的功能和机制。

 设计敲除基因序列：首先需要设计目标敲除的GSDMD基因序列，通常使用CRISPR/Cas9系统来实现基因编辑和敲除。 

2.合成和克隆CRISPR/Cas9重组质粒：将设计好的CRISPR/Cas9重组质粒通过合成生物学技术进行合成和克隆，以确保实验中正确引导基因敲除。 

3.体外细胞培养：将目标细胞（如RAW 264.7巨噬细胞）进行细胞培养，以确保细胞状态良好，并作为后续实验的实验材料。 

4.转染CRISPR/Cas9系统：将设计好的CRISPR/Cas9重组质粒转染至目标细胞中，引导Cas9蛋白对GSDMD基因进行切割，实现基因敲除。 

5.筛选敲除细胞系：通过细胞筛选方法（例如荧光激活细胞排序或药物筛选等）筛选出成功敲除GSDMD基因的细胞系，并进行鉴定和验证。 

6.确定敲除效果：通过PCR、Western blot等技术验证敲除细胞系中GSDMD基因的敲除效果，确保目标基因已被成功敲除。 

7. 进一步研究敲除细胞系：利用敲除细胞系进行细胞生物学实验、功能研究或药物筛选等，探究GSDMD基因在细胞焦亡等生物学过程中的作用和机制。

Species

Gene ID

GenBank Accession

Transcript

Human (Homo sapiens)

GSDMD

NM_001166237.1

NP_001159709.1