| 细胞基本属性 | |||||
| 产品名称 | ASC/CARD5 knockout THP-1 cell line | ||||
| 产品货号 | IMKO-H037 | ||||
| 产品规格 | 1×106cells/T25或1mL冻存管 | ||||
| 储存及运输 | 干冰运输;储存在液氮中 | ||||
| 产品分类 | THP-1细胞 | ||||
| 物种 | 人 | ||||
| 修饰基因 | ASC/CARD5 | ||||
| 修饰类型 | 基因敲除 | ||||
| 转导方法 | CRISPR/Cas9 | ||||
| 克隆类型 | 纯化克隆 | ||||
| 细胞鉴定 | 通过遗传学方法确认ASC/CARD5基因敲除 | ||||
| 细胞形态 | 上皮细胞样 | ||||
| 生长特性 | 贴壁生长 | ||||
| 培养体系 | 90%MEM+10% FBS+1%PS | ||||
| 传代比例 | 1：2至1：3 | ||||
| 传代周期 | 每周3次 | ||||
| 培养条件 | 气相：95%空气+5%二氧化碳;温度：37℃ | ||||
| 冻存条件 | 无血清冻存液，液氮储存 | ||||
补充内容 | ASC/CARD5基因编码的蛋白质是ASC家族的一员，ASC蛋白质在细胞凋亡信号传导中起着重要作用。它们通过与caspase-1和caspase-4等caspase蛋白酶结合，参与炎症小体（inflammasome）的形成，后者在调控炎症反应中非常关键。ASC/CARD5基因的突变或异常表达与某些炎症性疾病和自身免疫病有关。 | ||||
| 构建方法 |  | ||||
| ASC/CARD5基因敲除细胞系构建通常涉及的步骤 | 1. 设计sgRNA：设计特异性引导RNA（sgRNA），可将Cas9核酸酶精确地定位到ASC/CARD5基因上，以实现基因敲除。 2.构建CRISPR/Cas9系统：将设计好的sgRNA与Cas9核酸酶结合，形成CRISPR/Cas9系统，用于精准敲除ASC/CARD5基因。 3.细胞系转染：通过质粒转染、病毒载体转染等方法将CRISPR/Cas9系统导入目标细胞系中。 4.筛选敲除细胞系：通过细胞系克隆、PCR技术等方法筛选出成功敲除ASC/CARD5基因的细胞系。 5.验证细胞系：通过测序确认ASC/CARD5基因是否被成功敲除，并进行功能实验验证基因敲除的效果。 6. 扩大培养：筛选出ASC/CARD5基因敲除细胞系后，进行细胞系的扩大培养，为后续的细胞学和分子生物学实验做准备。 | ||||
| ASC/CARD5基因的基本信息 | Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
Human (Homo sapiens) | ASC | 29108 | NP_037390 | NP_037390.2 | |
| 关于基因 | Official Symbol | CARD5 | |||
| Previous Symbol | ASC | ||||
| Official Full Name | Caspase Recruitment Domain Family, Member 5 | ||||
| Synonyms | ASC, PYCARD, TMS, MAF | ||||
| Location | 16p11.2 | ||||
| Gene Type | Protein-coding | ||||
| Uniprot ID | Q96D12, Q9BSZ5, Q9HBD0, Q9NXJ8, Q9ULZ3 | ||||
| Pathway/Library | ASC signaling pathway, NOD-like receptor signaling pathway | ||||
| Gene Summary | This gene encodes an adaptor protein that is composed of two protein-protein interaction domains: a N-terminal PYRIN-PAAD-DAPIN domain (PYD) and a C-terminal caspase-recruitment domain (CARD). The PYD and CARD domains are members of the six-helix bundle death domain-fold superfamily that mediates assembly of large signaling complexes in the inflammatory and apoptotic signaling pathways via the activation of caspase. In normal cells, this protein is localized to the cytoplasm; however, in cells undergoing apoptosis, it forms ball-like aggregates near the nuclear periphery. Two transcript variants encoding different isoforms have been found for this gene. [provided by RefSeq, Jul 2008] | ||||
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