CERS2 knockout THP-1 cell line

补充内容

CERS2（ceramide synthase 2）是一种催化合成鞘氨醇和鞘磷脂的酶，它在细胞膜的生物合成和信号传导中发挥重要作用。CERS2是鞘氨醇合成途径的关键酶，负责将长链脂肪酸和丝氨酸转化为鞘氨醇，后者是鞘脂类生物分子如鞘磷脂和神经酰胺的前体。 CERS2的活性受到多种因素的影响，包括细胞内的代谢状态和细胞应激反应。此外，CERS2的表达和活性在不同的细胞类型和生理条件下可能有所不同，例如在炎症和肿瘤等病理状态下，CERS2的表达和活性可能会改变。 在实验室研究中，CERS2通常作为鞘脂类生物合成的标志物，用于研究细胞内脂质代谢的调控。此外，CERS2的过表达或缺失模型被用于研究其在细胞生长、凋亡和炎症反应中的作用。 CERS2基因敲除模型用于研究其在体内的功能。这些模型显示，CERS2的缺失会导致鞘脂类生物合成和细胞膜结构的改变，影响细胞的生长、分化和代谢。 在临床研究中，CERS2的表达和活性可以作为诊断和监测某些疾病进展的指标。通过深入了解CERS2的功能和作用，科学家们希望能够开发出新的治疗方法来治疗与鞘脂类生物合成和脂质代谢相关的疾病。

1.设计敲除序列：设计特定的DNA序列，这些序列可以与CERS2基因的靶位点结合，从而导致基因的敲除。 

2.构建表达载体：将设计的sgRNA序列和Cas9基因克隆到表达载体中，这个载体将被转染到目标细胞中。 

3.细胞转染：将构建的表达载体通过化学方法或病毒载体系统转入目标细胞中。 

4.基因编辑：Cas9酶在sgRNA的引导下识别并切割目标基因，导致DNA断裂。 

5.筛选和验证：通过PCR、测序或特定的分子标记来确认是否成功敲除CERS2基因。 

6.功能分析：对敲除CERS2基因的细胞进行功能分析，以评估基因敲除对细胞代谢、生长和分化的影响。 

7. 稳定细胞系的建立：经过验证的敲除细胞会继续培养，以建立稳定的细胞系。

Species

Gene ID

GenBank Accession

Transcript

Human (Homo sapiens)

CERS2

NM_181746.4

NP_859530.1