TLR4 knockout THP-1 cell line

补充内容

TLR4（Toll样受体4）是一种在先天免疫系统中起重要作用的模式识别受体。它主要识别脂多糖（LPS），这是革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分。当TLR4识别LPS时，它启动一系列信号传导途径，包括NF-κB和MAPK途径，这些途径导致炎症因子的产生，如肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素（IL）-1β，从而引发免疫反应。 TLR4的失调与多种疾病有关，包括感染、炎症性疾病、自身免疫性疾病和某些类型的癌症。因此，TLR4是药物设计和疾病治疗中的一个重要靶点。 在实验室研究中，TLR4通常作为细菌感染和炎症反应的一个标志物，用于研究细胞如何响应细菌感染。此外，TLR4的过表达或缺失模型被用于研究其在细胞生长、凋亡和炎症反应中的作用。 TLR4基因敲除模型用于研究其在体内的功能。这些模型显示，TLR4的缺失会导致对革兰氏阴性细菌感染的抵抗力减弱，影响细胞的生存和功能。 在临床研究中，TLR4的表达和活性可以作为诊断和监测某些疾病进展的指标。通过深入了解TLR4的功能和作用，科学家们希望能够开发出新的治疗方法来治疗与细菌感染和炎症反应相关的疾病。

1.设计敲除序列：设计特定的DNA序列，这些序列可以与TLR4基因的靶位点结合，从而导致基因的敲除。 

2.构建表达载体：将设计的sgRNA序列和Cas9基因克隆到表达载体中，这个载体将被转染到目标细胞中。 

3.细胞转染：将构建的表达载体通过化学方法或病毒载体系统转入目标细胞中。 

4.基因编辑：Cas9酶在sgRNA的引导下识别并切割目标基因，导致DNA断裂。 

5.筛选和验证：通过PCR、测序或特定的分子标记来确认是否成功敲除TLR4基因。 

6.功能分析：对敲除TLR4基因的细胞进行功能分析，以评估基因敲除对细胞代谢、生长和分化的影响。 

7. 稳定细胞系的建立：经过验证的敲除细胞会继续培养，以建立稳定的细胞系。

Species

Gene ID

GenBank Accession

Transcript

Human (Homo sapiens)

TLR4

NM_138554.5

NP_612564.1