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Steminduce系列
拟胚体分化

Steminduce系列拟胚体分化试剂盒

货号:IMV-S002

价格:
 5500元

规格:

货期:现货

  • 产品信息

Steminduce系列拟胚体分化试剂盒使用说明书

产品简介

Steminduce系列拟胚体分化试剂盒是逸漠生物研发,能够支持人类胚胎干细胞(human embryonic stem cell, hESC)以及人类诱导多能干细胞(human induced pluripotent stem cell, hiPSC)生成拟胚体(embryoid body,EB),并保证在后续培养过程的存活,为后续分化实验提供支持。

该试剂盒不含血清成分,经过H1、H9、iPSC细胞多次验证,能够稳定、大量形成拟胚体。

产品信息

内毒素含量≤25 EU/mg

微信截图_20241030152929.jpg       

储存条件

冰袋运输,收到后基础培养基与补充剂分装保存在-20℃,保存6个月;2~8℃解冻,保存2周,禁止反复冻融。

使用说明

以六孔板为例

1、基础培养基、补充剂提前解冻,实验前基础培养基、accutase消化液复温到室温。

2、当iPSC/hESC生长至70-80%汇合度,镜下观察细胞状态良好。

3、吸弃培养基。

4、每孔加入1mL accutase消化液,于37℃培养箱中消化5min。

5、.取11mL EB形成培养基与22μL EB形成补充剂混匀获得EB形成完全培养基,于超低吸附6孔板的3个孔每孔加入2mL EB形成完全培养基。

6、当看到克隆发白发亮,轻轻拍打板侧(每侧拍两下),把细胞拍下来,再在生物安全柜中,加入1mL EB形成完全培养基终止消化,把这2mL体系吸入装有3mL EB形成完全培养基的15mL离心管离心160g 5min,吸弃上清至剩余几十微升,轻弹孔底3-4下,让细胞沉淀溶于上清,往孔板里加1mL EB形成完全培养基,轻弹3-4下,混匀即可,把这一毫升细胞悬液平均悬空加入提前准备的6孔板3个孔中,37℃、5%CO2过夜。

7、第二天镜下观察可以看到形成大量、均一的EB,半数换液,补充50%EB形成培养基(不含补充剂),置于水平摇床培养。

8、每天更换基础培养基,或进行后续分化实验。

注意事项

1、iPSC/hESC形成拟胚体最佳密度大约为1.5*105细胞/mL,对于六孔板,当一孔细胞生长至70-80%汇合度时,可用于六孔板3个孔的拟胚体形成。

2、形成拟胚体iPSC/hESC细胞保持未分化的状态,请在实验前确定细胞状态良好。

3、第二天可以看到大量拟胚体形成,不过个体较小,不建议直接进行分化等实验,推荐第三天进行实验。

示图

image.png

H1 形成拟胚体第二天(A),第三天(B),40X。

细胞培养操作视频

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